陳作紅教授課題組在劇毒鵝膏菌快速分子檢測研究中取得重要進(jìn)展
近年來我國因誤食野生蘑菇而中毒的事件頻繁發(fā)生，野生蘑菇中毒已成為我國食物中毒導(dǎo)致死亡的最主要原因，因此中毒后對蘑菇種類的早期鑒定對中毒診斷和治療具有非常重要的意義。由于80%以上的中毒死亡是因食用劇毒的鵝膏菌引起，而由于鵝膏菌物種的多樣性與中毒現(xiàn)場樣本的不完整性，以及形態(tài)鑒定需要專業(yè)分類工作者，分子生物學(xué)鑒定還需要PCR儀和DNA測序等專業(yè)技術(shù)和手段，故中毒后蘑菇種類的早期鑒定所需時(shí)間長，難以滿足基層疾控和醫(yī)療單位對毒蘑菇中毒快速鑒定毒源的要求。
我院真菌研究室陳作紅教授課題組經(jīng)過多年研究，在劇毒鵝膏菌分子生物學(xué)技術(shù)快速檢測研究方面取得了重要進(jìn)展。研究成果“Universal Identification of Lethal Amanitas by Using Hyperbranched Rolling Circle Amplification Based on α-amanitin Gene Sequences”于6月17日發(fā)表在Food Chemistry（SCI 1區(qū)，IF=5.399）；“Development and Evaluation of Isothermal Amplification Methods for Rapid Detection of Lethal Amanita Species”6月18日發(fā)表在Frontiers in Microbiology（SCI 2區(qū)，IF=4.259）。
該項(xiàng)研究主要利用兩種恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)——環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)（loop-mediated isothermal amplification，LAMP）和超分支滾環(huán)擴(kuò)增技術(shù)（hyperbranched rolling circle amplification，HRCA），基于α-鵝膏毒肽基因（α-AMA）序列和核糖體DNA內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)（ITS）序列設(shè)計(jì)了一系列引物和探針，建立了一系列針對劇毒鵝膏菌的快速分子檢測方法，可以快速地鑒定和區(qū)分親緣關(guān)系非常近的劇毒鵝膏各物種，準(zhǔn)確識別和區(qū)分劇毒鵝膏和非劇毒鵝膏。相比傳統(tǒng)的PCR法，該方法具有更高的特異性和靈敏性，簡單快速，成本低，1-2小時(shí)內(nèi)就能完成檢測反應(yīng)，判斷反應(yīng)結(jié)果，有利于醫(yī)護(hù)人員對中毒患者的準(zhǔn)確診斷及采取更恰當(dāng)?shù)闹委煷胧浅＿m合于基層單位推廣和中毒現(xiàn)場應(yīng)用，對蘑菇中毒物種的快速鑒定和中毒患者的診斷、治療具有非常重要的意義。
該2篇論文的第一作者均為真菌研究室的博士生何正蜜，通訊作者均為陳作紅教授。該項(xiàng)研究得到了國家自然科學(xué)基金資助，并獲得湖南省生態(tài)學(xué)重點(diǎn)學(xué)科的支持。
劇毒鵝膏菌快速分子檢測流程
發(fā)表的論文鏈接1
https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0308814619311331
發(fā)表的論文鏈接2
https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fmicb.2019.01523/abstract
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