久久精品酒店无码视频_g∨天堂在线观看免费_av之高清在线_午夜福利资源片在线

?

近日，北京大學(xué)化學(xué)與分子工程學(xué)院賈桂芳課題組在 《Molecular Plant》 上在線發(fā)表了題為 “Arabidopsis N6-methyladenosine reader CPSF30-L recognizes FUE signal to control polyadenylation site choice in liquid-like nuclear body” 的研究論文。該研究鑒定了CPSF30-L為植物擬南芥中的一個全新m6A結(jié)合蛋白，揭示了CPSF30-L依賴m6A識別促進(jìn)相變過程，以及調(diào)控選擇性多聚腺苷酸化的分子機(jī)制。

m6A是mRNA上豐度最高的化學(xué)修飾，普遍存在于動物、植物、真菌以及RNA病毒之中。m6A可以分別在甲基轉(zhuǎn)移酶復(fù)合物和去甲基酶的作用下被可逆地添加和去除，并由m6A結(jié)合蛋白識別并影響RNA代謝的各個方面。盡管m6A相關(guān)蛋白在哺乳動物中已經(jīng)被充分地鑒定及表征，但m6A在植物生長發(fā)育中以及RNA代謝中的調(diào)控功能研究仍十分有限。

賈桂芳課題組致力于研究m6A在植物體中影響生長發(fā)育以及刺激響應(yīng)的分子機(jī)制，在此前的研究中，該課題組繪制了植物擬南芥和玉米的RNA修飾m6A全轉(zhuǎn)錄圖譜（Nature Communications, 2014, 5, 5630；Plant Physiology, 2020, 182, 332），鑒定了植物擬南芥中m6A去修飾酶ALKBH10B和第一個m6A結(jié)合蛋白ECT2的生物功能（Plant Cell, 2018, 30, 968；Plant Cell, 2017, 29, 2995），推動了植物中表觀轉(zhuǎn)錄組學(xué)的研究。不同的m6A識別蛋白在mRNA的代謝過程中發(fā)揮著不同的調(diào)控功能， m6A結(jié)合結(jié)構(gòu)域YTH在擬南芥中有13種同源蛋白之多，然而對于擬南芥中YTH結(jié)合家族蛋白的研究以及調(diào)控機(jī)制相對較少。

該研究鑒定出擬南芥中CPSF30-L為m6A的結(jié)合蛋白，并且發(fā)現(xiàn)CPSF30-L可以通過m6A的結(jié)合能力影響擬南芥的開花以及ABA響應(yīng)。亞細(xì)胞定位以及FRAP實(shí)驗(yàn)表明CPSF30-L蛋白分布于細(xì)胞核中并發(fā)生液液相分離形成核體結(jié)構(gòu)，并且CPSF30-L的m6A結(jié)合功能可以促進(jìn)相分離的核體形成。

利用該課題組之前開發(fā)的甲醛交聯(lián)-免疫共沉淀技術(shù)，在全轉(zhuǎn)錄組水平上鑒定了CPSF30-L-RNA相互作用位點(diǎn)，揭示了CPSF30-L主要結(jié)合mRNA的3'非翻譯區(qū) (3'UTR),并且傾向于結(jié)合保守m6A基序以及聚腺苷酸化信號—UGUA、GAAMH、AAUAAA，暗示CPSF30-L通過識別m6A修飾的聚腺苷酸化信號調(diào)控pre-mRNA 3'末端的加工過程。隨后，對野生型和CPSF30-L的T-DNA插入突變體cpsf30-l進(jìn)行poly(A)位點(diǎn)測序分析，發(fā)現(xiàn)CPSF30-L的破壞會整體影響poly（A）位點(diǎn)的選擇，進(jìn)一步的分析證實(shí)，CPSF30-L通過識別 m6A修飾的FUE聚腺苷酸化信號進(jìn)而精密控制poly（A）位點(diǎn)的選擇。

與擬南芥開花以及ABA響應(yīng)的三個基因SOC1, RPN10及FYVE1的轉(zhuǎn)錄本可以被m6A修飾且被CPSF30-L結(jié)合。相對于野生型而言，在cpsf30-l中，SOC1, RPN10及FYVE1的pre-mRNA在3’UTR加工過程中更傾向于遠(yuǎn)端poly(A)位點(diǎn)，導(dǎo)致3’UTR加長易被降解，相應(yīng)mRNA表達(dá)量下降，繼而導(dǎo)致cpsf30-l突變體中呈現(xiàn)出晚花以及ABA響應(yīng)敏感的表型（圖一）。這項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)了植物中m6A的全新功能—調(diào)控植物pre-mRNA聚腺苷酸化和植物相分離的分子機(jī)制。

圖一. CPSF30-L 調(diào)控聚腺苷酸化的分子機(jī)制圖

?

北京大學(xué)化學(xué)與分子工程學(xué)院賈桂芳研究員為該論文的通訊作者，2017級博士研究生生宋培哲，博士后楊軍波為該論文的共同第一作者，該研究得到了科技部、國家自然科學(xué)基金委、北京大學(xué)及北京分子科學(xué)國家研究中心的資助。

?

文章鏈接: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1674205221000149

?