??????? 該技術(shù)的設(shè)計(jì)包括兩個(gè)部分:a)一套帶有翻譯后修飾的賴氨酸遺傳編碼系統(tǒng),可以在特定位點(diǎn)插入帶修飾的賴氨酸。此外,在賴氨酸的主鏈上還帶有光交聯(lián)基團(tuán),可在UV光下與修飾相關(guān)的蛋白發(fā)生共價(jià)交聯(lián),可以用于研究該修飾特定的效應(yīng)蛋白。b)一套帶有保護(hù)基團(tuán)的賴氨酸遺傳編碼系統(tǒng),保護(hù)基團(tuán)可以在大腸桿菌自身的還原性環(huán)境中發(fā)生脫除,將帶有光交聯(lián)基團(tuán)的賴氨酸定點(diǎn)插入到組蛋白當(dāng)中,用于證實(shí)交聯(lián)到的效應(yīng)蛋白的特異性。該團(tuán)隊(duì)以巴豆?;揎棡榇恚l(fā)展了該技術(shù)對(duì)應(yīng)的賴氨酸巴豆?;揎椀墓饨宦?lián)探針(K*cr)和帶有保護(hù)基團(tuán)的光交聯(lián)探針(PNBK*)兩個(gè)探針,將這兩種探針分別引入到組蛋白H3的56位和79位,并通過光交聯(lián)基團(tuán)捕捉到了H3上79位巴豆?;娜グ投辊;?/span>Sirt3。
??????? 北京大學(xué)陳鵬教授和香港大學(xué)李祥教授為本文的共同通訊作者;化學(xué)與分子工程學(xué)院14級(jí)博士生謝肖、香港大學(xué)13級(jí)博士生李小萌、生命科學(xué)聯(lián)合中心15級(jí)博士生秦芳菲,為該文的共同第一作者。此項(xiàng)研究得到了國家自然科學(xué)基金委、科技部、北大-清華生命科學(xué)聯(lián)合中心、香港協(xié)作研究金(CRF),香港優(yōu)配研究金(GRF),杰出青年學(xué)者計(jì)劃(ECS)的資助。
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