難溶肽的純化技術(shù)
多肽廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥，材料，染料等多種領(lǐng)域，多肽的溶解性也是關(guān)系實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)成功與否的重要因素。
一般來說，多肽的溶解性通常與整條肽鏈的氨基酸序列密切相關(guān)，通常整體顯酸性的多肽溶解困難時(shí)可以加入適量的堿性溶液，而顯堿性的多肽溶解困難時(shí)可以加入適量的酸性溶液，序列中含有大量疏水性氨基酸或中性氨基酸時(shí)，難于直接溶于水，通常需要先加入少量有機(jī)溶劑，溶解完全后用蒸餾水大量稀釋，常用的有機(jī)溶劑有乙腈，DMSO，DMF，丙醇，異丙醇等。需要注意的是，當(dāng)肽鏈中含有Met或者Cys時(shí)，不能用DMSO溶解，這很可能會導(dǎo)致肽鏈中含有的S被氧化。此外為了幫助客戶設(shè)計(jì)的多肽達(dá)到良好的實(shí)驗(yàn)效果，針對肽鏈的物理性質(zhì)，化學(xué)性質(zhì)和分子結(jié)構(gòu)，我們通常會對客戶給出一些有效的建議。
針對客戶的訂單，我們通常會給出以下建議來增加難溶肽的溶解度：
1. 對肽鏈中C端和N端進(jìn)行修飾：對于酸性肽，我們推薦C端乙?；揎棧瑢τ趬A性肽，我們推薦N端氨基化修飾。
2. 修改肽鏈中的氨基酸序列：某些序列存在大量的連續(xù)的疏水性氨基酸，例如W, F, V, I, L, M, Y ,這些疏水氨基酸在序列中大量或者連續(xù)重復(fù)出現(xiàn)時(shí)，整條肽鏈通常是難溶的，為了增強(qiáng)肽的極性和親水性，我們也會建議客戶在不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的基礎(chǔ)上，延長序列，或者通過減少疏水性氨基酸的個(gè)數(shù)來增加溶解性。
3. 替換序列中疏水性氨基酸的殘基：用可溶性的氨基酸替代序列中的疏水性氨基酸可以達(dá)到增加溶解度的效果。我們通常用Gly, Ala來替換疏水性氨基酸，一般都會取得比較好的溶解效果，這也是一種保守但有效的增強(qiáng)多肽溶解度的方法。
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