??? 盧建平副教授研究小組建立了一種適用于絲狀真菌的高通量基因敲除系統(tǒng):該系統(tǒng)利用了一種新設(shè)計(jì)的能在酵母、大腸桿菌和農(nóng)桿菌三種生物中復(fù)制的雙元載體, 通過熒光蛋白/抗性基因雙向篩選系統(tǒng)篩選敲除突變體并排除隨機(jī)插入突變體,用雙重PCR和定量PCR代替DNA雜交驗(yàn)證基因敲除突變體,實(shí)現(xiàn)了絲狀真菌基因敲除從載體構(gòu)建到突變體驗(yàn)證的高通量操作。研究小組使用該高通量基因敲除系統(tǒng)敲除了稻瘟病菌104個(gè)Zn2Cys6鋅指結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)錄因子,發(fā)現(xiàn)了一批真菌發(fā)育和致病必需的轉(zhuǎn)錄因子。該成果以Systematic Analysis of Zn2Cys6 Transcription Factors Required for Development and Pathogenicity by High-Throughput Gene Knockout in the Rice Blast Fungus為題發(fā)表在PLoS Pathogens(IF5-years=8.9)。
http://www.plospathogens.org/article/info:doi/10.1371/journal.ppat.1004432
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