近日,食品與制藥工程學(xué)院黃和教授團隊在美國化學(xué)會-分析化學(xué)TOP期刊《Analytical Chemistry》(影響因子6.785)上以內(nèi)封面形式發(fā)表題為“Signal-Amplified Detection of the Tumor Biomarker FEN1 Based on Cleavage-Induced Ligation of a Dumbbell DNA Probe and Rolling Circle Amplification”的研究論文(DOI: 10.1021/acs.analchem.0c05275),報道了一種腫瘤標志物的超靈敏檢測新方法。
瓣狀核酸內(nèi)切酶(FEN1)是一種結(jié)構(gòu)特異性核酸酶,參與岡崎片段成熟、長片段堿基切除等DNA代謝過程,在DNA復(fù)制與修復(fù)中發(fā)揮重要作用。由于FEN1起到支持細胞增殖的作用,其表達水平可以反映細胞增殖速率。腫瘤細胞是一類過度增殖的細胞,腫瘤細胞中的FEN1通常處于高表達狀態(tài)。研究發(fā)現(xiàn)FEN1表達水平與乳腺癌、卵巢癌等腫瘤的惡性程度密切相關(guān)。因此,F(xiàn)EN1被視為一種重要的腫瘤標志物,對其檢測有助于惡性腫瘤的早期診斷、病程監(jiān)控、療效評價。
現(xiàn)有的FEN1檢測方法多依賴復(fù)雜的大型儀器,檢測過程繁瑣、穩(wěn)定性差、靈敏度低,難以滿足臨床實踐的需求。為此,我校食品與制藥工程研究人員設(shè)計、制備了一種FEN1響應(yīng)性的啞鈴型DNA探針,該探針可以在FEN1作用下被剪切、環(huán)化,作為模板參與核酸滾環(huán)擴增反應(yīng)(RCA),產(chǎn)生長鏈的重復(fù)DNA片段與熒光染料結(jié)合并發(fā)出強烈熒光。該方法的檢測限達到15 fM(15×10-15mol/L),靈敏度較之前的報道提升近20倍。該項研究還嘗試將這一分析方法拓展用于FEN1抑制劑的篩選,并建立了化合物對FEN1抑制效應(yīng)的快速評價技術(shù),為涉及FEN1的醫(yī)學(xué)診斷與藥物研發(fā)提供了有力的新工具。
南京師范大學(xué)為該論文唯一通訊單位,黃和教授和張幸教授為共同通訊作者,我校青年教師李昺之博士為第一作者。
原文鏈接:https://pubs.acs.org/doi/full/10.1021/acs.analchem.0c05275
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