SpCas9是最常用的基因編輯工具,具有活性高、編輯范圍大的優(yōu)點(識別NGG PAM)【1】。但是SpCas9比較大,不能被包裝到AAV病毒中用于基因治療【2】。隨后科研人員開發(fā)出了幾個小型CRISPR/Cas9工具,能夠被包裝到AAV病毒中。其中SaCas9活性較高,但是編輯范圍?。ㄗR別NNGRRT PAM)【3】。其它幾個小型CRISPR/Cas9活性偏低。
2020年3月31日,復旦大學王永明課題組聯(lián)合復旦大學王紅艷課題組在PLOS Biology上在線發(fā)表了題為“A compact Cas9 ortholog from staphylococcus auricularis (SauriCas9) expands the DNA targeting scope”的研究論文。研究者開發(fā)出了一個新的小型CRISPR/Cas9工具,具有活性高(和SaCas9相當)、編輯范圍大的優(yōu)點。該Cas9來源于耳氏葡萄球菌(Staphylococcus auricularis),被命名為SauriCas9,識別NNGG PAM序列,編輯范圍與常用的SpCas9一樣。
圖1. SauriCas9的PAM及其活性比分析
SauriCas9通過AAV病毒包裝后,在多種細胞類型中實現(xiàn)了基因編輯(圖2),說明SauriCas9具有用于基因治療的潛力。
圖2. 利用AAV病毒遞送后SauriCas9的編輯效率
此外,研究者還把SauriCas9與脫氨酶融合,制作了兩種新的堿基編輯器,本別是SauriBE4max和SauriABEmax,可以實現(xiàn)C-T或者A-G兩種堿基轉換(圖3)。
圖3. SauriCas9用于堿基編輯
胡子英博士是論文第一作者,王永明研究員是論文的通訊作者。
原文鏈接:https://journals.plos.org/plosbiology/article?id=10.1371/journal.pbio.3000686
參考文獻:
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