Nature Protocols 封面刊發(fā)華理學者納米孔道分析新方法
??????? 2017年8月24日，Nature Protocols以封面文章的形式，發(fā)表了華東理工大學化學與分子工程學院龍億濤科研團隊在納米孔道的研究成果-“Construction of an aerolysin nanopore in a lipid bilayer for single oligonucleotide analysis”。該文章報道了以Aerolysin氣單胞菌溶素構(gòu)建成的電化學限域納米孔道，建立了單分子水平分析技術(shù)平臺，可對單個寡聚核苷酸分子進行高靈敏、高分辨檢測，應用于核酸外切酶逐步剪切單鏈DNA動力學行為的實時觀測，實現(xiàn)單酶分子動態(tài)催化過程研究。
??????? 納米孔道單分子分析的是將單個分子利用電化學技術(shù)限域在納米尺寸的孔道空間內(nèi)，精準測量待測分子與納米孔道間的弱相互作用所產(chǎn)生的特征性電流信號譜圖，從而獲取單個待測分子的動態(tài)行為信息。在Nature Protocols發(fā)表的文章中詳細介紹了Aerolysin生物納米孔道單分子檢測平臺的構(gòu)建步驟，即Aerolysin經(jīng)胰蛋白酶活化后在水溶液中自組裝形成七聚體，自發(fā)嵌入磷脂雙分子層，從而形成直徑約為1 nm的跨膜蛋白限域孔道。利用基于Aerolysin構(gòu)建的納米孔道單分子檢測平臺，無需任何基因突變、化學修飾實現(xiàn)了寡聚核苷酸分子等生物分子的超靈敏分析，可應用于DNA損傷檢測、microRNA分析的精準分析，以期在多肽分子動態(tài)構(gòu)象分析，蛋白質(zhì)測序研究等領域?qū)崿F(xiàn)突破。
??????? 論文中使用的儀器裝置和實驗步驟是該團隊多年來的技術(shù)發(fā)展和實踐總結(jié)，曹嬋博士和廖冬芳同學是論文的共同第一作者，研究工作得到田禾院士大力支持和細心指導，獲得國家自然科學基金委創(chuàng)新研究群體、重大科研儀器研制專項，高等學校學科創(chuàng)新引智計劃、上海市優(yōu)秀學科帶頭人計劃和中央高?；究蒲袑ｍ椯Y金的資助。
論文鏈接：http://www.nature.com/nprot/journal/v12/n9/full/nprot.2017.077.html
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