甲基化修飾多肽
       也叫甲基化標(biāo)記多肽，甲基化修飾是蛋白質(zhì)翻譯后修飾（PTMs）的一種，幾乎參與細(xì)胞所有的生命活動(dòng)過程，發(fā)揮著重要的調(diào)控作用，蛋白質(zhì)在甲基轉(zhuǎn)移酶的催化下將甲基轉(zhuǎn)移至特定的氨基酸殘基上共價(jià)結(jié)合的過程。甲基化是一種可逆的修飾過程，由去甲基化酶催化去甲基化作用。
       研究發(fā)現(xiàn)，常見甲基化／去甲基化作用的氨基酸主要是賴氨酸（Lys）和精氨酸（Arg）研究表明，組蛋白賴氨酸甲基化修飾執(zhí)行著多種生物學(xué)功能，如干細(xì)胞的維持和分化、Ｘ染色體失活、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)和ＤＮＡ損傷反應(yīng)等，主要是影響染色質(zhì)濃縮，抑制基因表達(dá)。組蛋白精氨酸甲基化在基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控中發(fā)揮著重要作用，并能影響細(xì)胞的多種生理過程，包括DNA修復(fù)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞發(fā)育及癌癥發(fā)生等因此專肽生物特地開發(fā)甲基化修飾多肽技術(shù)，為科學(xué)家在蛋白質(zhì)翻譯后修飾（PTMS）的研究中提供幫助。

甲基化修飾(Me1，Me2，Me3)

       采用高品質(zhì)的Fmoc-Lys(Me,Boc)-OH、 Fmoc-Lys(Me2)-OH、Fmoc-Lys(Me3)-OH.HCL、Fmoc-Arg(Me,Pbf)-OH 、Fmoc-Arg(me)2-OH.HCl(asymmetrical) 、Fmoc-Arg(me)2-OH.HCl(symmetrical) 等原料，采用Fmoc固相合成工藝合成，得到Lys甲基化，Arg甲基化標(biāo)記的多肽，使用HPLC 對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行純化。最終產(chǎn)品提供相應(yīng)的質(zhì)譜圖，純度分析的HPLC 色譜圖。
 

定義
神經(jīng)肽的長(zhǎng)度為3-40個(gè)氨基酸，可作為神經(jīng)遞質(zhì)。它們廣泛分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng)和周圍神經(jīng)系統(tǒng)。

發(fā)現(xiàn)
神經(jīng)肽是由約翰·休斯博士和科斯特里茨博士于1975年發(fā)現(xiàn)的。它們是內(nèi)啡肽，內(nèi)在產(chǎn)生的嗎啡樣物質(zhì)，會(huì)在體內(nèi)產(chǎn)生一系列類似藥物的作用?？梢詮男蛄行畔?中鑒定神經(jīng)肽前體mRNA序列，并且得到的翻譯蛋白序列包括信號(hào)肽序列和一個(gè)或多個(gè)神經(jīng)肽。廣泛而復(fù)雜的一系列酶處理步驟，包括被激素或前蛋白轉(zhuǎn)化酶切割以及其他翻譯后修飾，在創(chuàng)建活性神經(jīng)肽之前就發(fā)生在翻譯后的蛋白質(zhì)序列上  2,3。

結(jié)構(gòu)特征
通過核磁共振（NMR）光譜研究了幾種來(lái)自軟體動(dòng)物的類似神經(jīng)肽的構(gòu)象性質(zhì)。肽的N末端可變區(qū)中的氨基酸取代對(duì)溶液中反向轉(zhuǎn)化的種群具有顯著影響。通過使用兩個(gè)獨(dú)立的NMR參數(shù)測(cè)得的轉(zhuǎn)彎數(shù)，發(fā)現(xiàn)使用Helix aspersa的受體膜制劑與IC50值高度相關(guān)（r2 = 0.93和0.82）。這些結(jié)果表明，構(gòu)象集合降低了特定肽相對(duì)于特定受體4,5的有效濃度。

神經(jīng)肽Y與人肽相同，并且與禽胰多肽高度同源。神經(jīng)肽Y和禽胰多肽之間的同源性保留了維持三級(jí)結(jié)構(gòu)必不可少的所有殘基。結(jié)果表明，神經(jīng)肽保留了緊湊的三級(jí)結(jié)構(gòu)，其特征是在N末端的聚脯氨酸II類螺旋和C末端的a螺旋 6之間廣泛的疏水相互作用。

已經(jīng)通過許多孤兒受體之一發(fā)現(xiàn)了一些肽，這些受體是內(nèi)源性配體未知的受體，例如“類阿片受體樣1”（ORL1）。隨后，已闡明該ORL1受體的內(nèi)源性激動(dòng)劑的結(jié)構(gòu)，一種稱為孤兒蛋白FQ或傷害感受蛋白的17個(gè)氨基酸的肽7。

行動(dòng)方式
神經(jīng)肽是由神經(jīng)元作為細(xì)胞間信使釋放的肽。一些神經(jīng)肽充當(dāng)神經(jīng)遞質(zhì)，而另一些充當(dāng)激素。神經(jīng)肽既可以為我們提供支持，也可以為我們提供幫助。抗炎神經(jīng)肽可幫助我們減少皮膚發(fā)炎。神經(jīng)肽是自然產(chǎn)生的，可以在非常有限的時(shí)間內(nèi)與靶細(xì)胞膜受體在明確的作用位點(diǎn)相互作用。因此，大多數(shù)這些內(nèi)源性化合物的特征在于低的生物屏障滲透性和非常高的酶促降解敏感性。腦室內(nèi)或全身注射神經(jīng)肽Y（NPY）可使cast割的雌性大鼠血漿中的促黃體生成激素（LH）水平降低。6。

功能

生物功能，神經(jīng)肽控制著我們的情緒，能量水平，痛苦和愉悅感，體重以及解決問題的能力；它們還會(huì)形成記憶，情感行為，食欲和發(fā)炎，修復(fù)疤痕和皺紋并調(diào)節(jié)我們的免疫系統(tǒng)。這些活躍的大腦小信使實(shí)際上打開了皮膚7的細(xì)胞功能。因此，今天，與神經(jīng)肽系統(tǒng)相互作用的藥物設(shè)計(jì)是后基因組藥物化學(xué)研究最廣泛的途徑之一。

P物質(zhì)已被確定為負(fù)責(zé)傷害性信號(hào)傳遞的主要神經(jīng)肽。內(nèi)源性阿片類藥物是天然神經(jīng)肽，負(fù)責(zé)傷害性信號(hào)的調(diào)節(jié)（通常是抑制）。

免疫系統(tǒng)，當(dāng)它們被分泌時(shí)，它們會(huì)激活自然殺傷細(xì)胞（NK細(xì)胞），從而增強(qiáng)我們的免疫系統(tǒng)。

隨著內(nèi)啡肽的分泌越來(lái)越多，血管病變使收縮的血管恢復(fù)到正常狀態(tài)，使血液以正常方式流動(dòng)。大多數(shù)成人疾病都始于血管堵塞。內(nèi)啡肽有助于改善血液循環(huán)。

內(nèi)啡肽通過去除超氧化物具有抗衰老作用。從呼吸進(jìn)入人體的氧氣可以轉(zhuǎn)變?yōu)槌趸?。這是造成人類疾病和衰老的最大敵人之一。

抗壓力激素，應(yīng)對(duì)壓力的能力與我們體內(nèi)的內(nèi)啡肽水平成正比。

緩解疼痛的作用是，我們的神經(jīng)系統(tǒng)在接收到疼痛信號(hào)時(shí)會(huì)分泌神經(jīng)遞質(zhì)。一旦內(nèi)啡肽在疼痛的那一刻被釋放，內(nèi)啡肽就會(huì)與神經(jīng)元上的內(nèi)啡肽受體結(jié)合，從而阻止第一種神經(jīng)遞質(zhì)被分泌出來(lái)。

記憶力，神經(jīng)肽可以改善記憶力，因?yàn)樗鼈兛梢允鼓X細(xì)胞保持年輕健康。

參考

1.     Hummon AB, Richmond TA, Verleyen P, Baggerman G, Huybrechts J, Ewing MA, Vierstraete E, Rodriguez-Zas SL, Liliane SL, Robinson GE (2006). From the genome to the proteome: uncovering peptides in the Apis brain. Science, 27(314):647-649.

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3.     Von ER, Beck-Sickinger AG (2004). Biosynthesis of peptide hormones derived from precursor sequences. Curr. Med. Chem.,11:2651–2665.

4.     Edison AS, Espinoza E, Zachariah C (1999). Conformational Ensembles: The Role of Neuropeptide Structures in Receptor Binding. The Journal of Neuroscience., 19(15):6318-6326.

5.     Payza K, Greenberg MJ, Price DA (1989). Further characterization of Helix FMRFamide receptors: kinetics, tissue distribution, and interactions with the endogenous heptapeptides. Peptides, 10:657-661.

6.     Allen J, Novotný J, Martin J, Heinrich G (1987). Molecular structure of mammalian neuropeptide Y: Analysis by molecular cloning and computer-aided comparison with crystal structure of avian homologue. PNAS., 84:2532-2536.

7.     Guya J, Lia S,  Pelletier G (1988). Studies on the physiological role and mechanism of action of neuropeptide Y in the regulation of luteinizing hormone secretion in the rat. Regulatory Peptides., 23(2):209-216.