修飾概述

1. N端或側(cè)鏈氨基的修飾

   乙?；?(Acetylation)

   甲?；?(Formylation)

   生物素標(biāo)記 (Biotin)

   脂肪酸修飾 (Palm, Myr,Lauryl)

   三氟乙?；?(TFA)

   苯甲酰化 (Bzo)

   2-氨基苯甲?；?(Abz)

   Maleimide

   氯乙?；?、溴乙酰化

   Suc修飾

   Hynic

   DOTA、NOTA (Chelating Peptides)

2. C端修飾

   酰胺化 (Amidation)

   酯化 (Esterification)

   AMC

   AFC 

   pNA

   CMK

   FMK

   醛基化(-CHO)

   醇基化(-ol)

   AOMK

3. 多肽磷酸化標(biāo)記

   p-Tyr

   p-Ser

   p-Thr

4. D型氨基酸

   常見氨基酸：D-Ala、D-Cys、D-Asp、D-Glu、D-Phe、D-His、D-Ile、D-Lys、D-Leu、D-Met、D-Asn、D-Pro、D-Gln、D-Arg、D-Ser、D-Thr、D-Trp、D-Tyr

   非常見氨基酸：D-Nle、D-Nal、D-Nva、D-Orn、D-Tic、D-Pen、D-Abu、D-Bal、D-Cha、D-Cit、D-Hyp、

5. 甲基化及其它烷基化修飾

   N-甲基化修飾：

   NMe-His、NMe-Met、NMe-Gly、NMe-Ala、NMe-Asn、NMe-Asp、NMe-Arg、NMe-Cys、NMe-Glu、NMe-Gln、NMe-Leu、NMe-Ile、NMe-Lys、NMe-Ser、NMe-Thr、NMe-Trp、NMe-Val、NMe-Nle、NMe-Phe

   其他位點(diǎn)甲基化修飾：Lys(Me)、Lys(Me)2、Lys(Me)3、Arg(Me)、Arg(Me)2S、Arg(Me)2AS、Cys(Me)、Asp(OMe)、Glu(OMe)、Tyr(Me)、Trp(Me)

   同一條序列的多個(gè)氨基酸N-烷基化（Peptoid)

   其它的烷基化修飾服務(wù)：N-乙基、N-苯丙基、N-烯丙基、Tyr(Et)、Trp(For)、Ser側(cè)鏈烷基化

6. 同位素標(biāo)記|多種氨基酸 (D型以及L型)的13C，15N，D以及18O的同位素標(biāo)記
7. 單熒光修飾

   N端、Lys或Cys巰基：

   FAM、FITC、TAMRA、Bodipy、Cy3、Cy5、Cy5。5、Cy7

   N端或Lys側(cè)鏈：

   DansylChlorde、Mca、Dabcyl、Dnp、CarboxyRhodamine110、7OHCCA、Tide Fluor 系列、Alexa Fluor 系列、Texas Red、QSY系列、Atto 系列

   Cys巰基：DACIA、Farnesyl

   Glu、Asp側(cè)鏈或者C端：Edans

8. 雙熒光修飾 (FRET peptide)

   Dabcyl+Edans

   Mca+Dnp

   FITC+5FAM

   5FAM+TQ2

   Cy5+QSY21

   6FAM+QSY9

   5TAMRA+QSY7

   DNP+DACIA

   5FAM+Farnesyl

   Tide Fluor 555+Tide Fluor 647

   Tide Fluor 488+Tide Flour550

9. 其它側(cè)鏈修飾

   Tyr衍生物：Tyr(3-Cl)、Tyr(3-NO2)、Tyr(SO3H2)

   Phe衍生物：Phe(4-Cl)、Phe(4-NO2)、Phe(3-Cl）、Phe(4-CF3)

   Ser側(cè)鏈烷基化：Ser(Butanoyl)、Ser(Octanoyl)、Ser(Palm)、Ser(Laury)、Ser(Myr)

10. PEG (聚乙二醇)修飾

    PEG2、PEG4、PEG8、PEG12、PEG24、PEG36

    PEG2000、PEG5000、PEG3400

    PEG20K、PEG40K

11. 多肽蛋白偶聯(lián)

    KLH (Keyhole Limpet Hemocyanin)

    BSA (Bovine Serum Albumin)

    OVA (Ovalbumin)

12. 環(huán)肽合成

    訂書肽(stapled and stiched peptide)

    首尾成環(huán)

    側(cè)鏈成環(huán)（內(nèi)酯、內(nèi)酰胺、醚鍵等）

    多重二硫鍵及二硒鍵(Sec&Sec)

    click chemistry（通過肽分子內(nèi)疊氮-炔基的Husigen反應(yīng)合成環(huán)肽）

    單硫醚環(huán)化

    Cyclization via xylene or mesitylene

13. 糖肽

    alpha-, beta-Glc and beta-N-acetylgalactosamine (GalNAc)

    Glucose: Ser(beta-D-GlcNAc), Thr(beta-D-GlcNAc, Asn(beta-D-GlcNAc), etc.

    Galactose: Ser(alpha-D-GalNAc) and Thr(alpha-D-GalNAc) (Tn Antigens)

    Ser(Gal-beta(1-3)GalNAc) and Thr (Gal-beta(1-3)GalNAc) (TF Antigens)

    Mannose: Ser(alpha-D-ManNAc), Thr(alpha-D-ManNAc, Ser(alpha-D-Man), Thr(alpha-D-Man)

C端或側(cè)鏈羧基修飾

杭州專肽生物可將各種含有氨基或羥基的小分子化合物或藥物分子，通過化學(xué)手段，與多肽的C端羧基，形成酰胺鍵或酯鍵，以合成種類繁多的多肽衍生物。以下展示部分常見的C端修飾種類。

C端修飾種類	修飾簡(jiǎn)寫	修飾結(jié)構(gòu)
酰胺化 (Amidation)	-NH2
甲氨基化 (Methylation)	-NHMe
乙胺基化 (Ethamidation)	-NHEt
己氨基化 (Hexamidation)	-NH(CH2)6
醇基化 (Alcoholylation)	-OL
甲酯化 (Methylation)	-OMe
乙酯化 (Ethylation)	-OEt
芐酯化 (Benzyl esterification)	-OBzl
醛基化 （Aldolization）	-CHO
對(duì)硝基苯胺 (P-nitroaniline)	-pNA
7-氨基-4-三氟甲基香豆素 (7-amino-4-trifluoromethylcoumarin)	-AFC
7-氨基-4-甲基香豆素 (7-amino-4-methylcoumarin)	-AMC
氯甲基酮 (Chloromethyl ketone)	-CMK
氟甲基酮 (Fluoromethyl ketone)	-FMC
2,6-二甲苯甲酰氧甲基酮 (2,6-xylyloxymethyl ketone)	-AOMK
多巴胺 (Dopamine)	-DOPA
苯胺 (Phenylamine)	-NHPh

成功案例（C端修飾或側(cè)鏈羧基修飾）

1， 產(chǎn)品序列：H-Arg-His-Asp-Asn-Phe-Gln-Ala-Val-Gly-Gly-Gly-Gly-Trp-Leu-NHCH2CH3

2， 產(chǎn)品結(jié)構(gòu)：

3，產(chǎn)品HPLC圖譜

4，產(chǎn)品MS圖譜

N端或側(cè)鏈氨基修飾

修飾名稱	修飾簡(jiǎn)寫	修飾結(jié)構(gòu)
生物素化 （Biotinylation）	Biotin-
生物素-6氨基己酸 （Biotin-Acp-）	Biotin-Acp-
2-疊氮乙酸 (2-azidoacetic Acid)	N3-Gly-
5-疊氮戊酸 (5-Azivalic Acid)	N3-Ava-
6-疊氮己酸 (6-azidohexanoic Acid)	N3-Acp-
3-馬來酰亞氨基丙酸 (3-Maleimidopropionic Acid)	MIPA-
6-馬來酰亞胺基己酸 (6-Maleimidocaproic Acid)	Mal-
丁酸 (Butyric Acid)	But-
丁二酸/琥珀酸 (Succinic Acid)	Suc-
異丁酸 (Isobutyric Acid)	Iba
N-炔丙基甘氨酸 (N-Propargylglycine)	N-Propargylglycine-
硫辛酸 (Lipoic Acid)	lipoic acid-

成功案例（側(cè)鏈氨基修飾）

1、產(chǎn)品序列：H2N-WHSDMEWWYLLGK(AEEA-MIPA)-OH，MIPA: 3-馬來酰亞氨基丙酸，AEEA: NH2-PEG2-乙酸
產(chǎn)品結(jié)構(gòu)：

2、HPLC圖：

3、MS圖：

熒光分子標(biāo)記

多肽熒光標(biāo)記由于沒有放射性，實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)單。因此，目前在生物學(xué)研究中多肽熒光標(biāo)記應(yīng)用非常廣泛，多肽熒光標(biāo)記方法與熒光試劑的結(jié)構(gòu)有關(guān)系，對(duì)于有游離羧基的采用的方法與接多肽反應(yīng)相同，也采用HBTU/HOBt/DIEA方法連接。 在N端標(biāo)記FITC的多肽需經(jīng)歷環(huán)化作用來形成熒光素，通常會(huì)伴有最后一個(gè)氨基酸的去除，但當(dāng)有一個(gè)間隔器如氨基己酸，或者是通過非酸性環(huán)境將目的多肽從樹脂上切下來時(shí)，這種情況可避免在切割的過程中被TFA切割掉。

（紅色加粗的熒光基團(tuán)，為常用基團(tuán))

成功案例（單熒光分子標(biāo)記）

1、產(chǎn)品序列：BHQ-1-Arg-Lys-Cys-Pro-Leu-Met-Trp-Ser-Gly-Gly-OH

2、產(chǎn)品結(jié)構(gòu)：

3、產(chǎn)品HPLC報(bào)告：

4、產(chǎn)品紫外檢測(cè)報(bào)告：

雙熒光標(biāo)記

修飾簡(jiǎn)寫	修飾結(jié)構(gòu)
Abz和pNA
DABCYL和EDANS
Dansyl和EDANS
Suc和AMC

成功案例（雙標(biāo)記）

1，產(chǎn)品序列：（Abz）-VAGL-pNA

2，產(chǎn)品結(jié)構(gòu)：

3，產(chǎn)品HPLC報(bào)告：

4，產(chǎn)品MS報(bào)告：

多肽磷酸化標(biāo)記

1、磷酸化應(yīng)用：磷酸肽在生命過程中發(fā)揮重要作用，磷酸化的位置在多肽上的Tyr、Ser，Thr，。目前磷酸肽合成一般都采用磷酸化氨基酸，目前使用的都是單芐基磷酸化氨基酸。磷酸化氨基酸的連接一般采用HBTU/HOBt/DIEA方法，但是目前采用該方法合成磷酸化多肽也有缺點(diǎn)，特別是在合成多磷酸化多肽或氨基酸較長(zhǎng)的多肽的時(shí)候，連接效率低，最后產(chǎn)品純度很低，對(duì)于這種磷酸化多肽，我們考慮采用后磷酸化方法，其合成過程就是在多肽合成結(jié)束后，選擇性脫去要標(biāo)記的氨基酸的側(cè)鏈保護(hù)基，對(duì)于Tyr，Thr可以直接使用側(cè)鏈不保護(hù)的氨基酸進(jìn)行反應(yīng)，而Ser可以采用Fmoc-Ser（trt），在1% TFA/DCM條件下可以定量的脫除。后磷酸化，采用雙芐基亞磷酰胺，四氮唑生成亞磷酰胺四唑活性中間體，連接到羥基上，隨后在過氧酸下氧化生成磷?；?，完成反應(yīng)。

2、磷酸化修飾分類

2.1. L型磷酸化修飾  

        Thr(H2PO3)、 pT 、蘇氨酸磷酸化
        Tyr(H2PO3)、pY 、酪氨酸磷酸化
        Ser(H2PO3) 、pS、絲氨酸磷酸化

2.2. D型磷酸化修飾

        D-Thr(H2PO3)、p(D-T)  、D型蘇氨酸磷酸化
        D-Tyr(H2PO3)、p(D-Y) 、D型酪氨酸磷酸化
        D-Ser(H2PO3) 、p(D-S)、D型絲氨酸磷酸化   

2.3.  雙磷酸化修飾

          一個(gè)序列中有兩個(gè)Thr，Tyr，Ser 位點(diǎn)進(jìn)行磷酸化修飾。

2.4.   多磷酸化修飾

          一個(gè)序列中有多個(gè)Thr，Tyr，Ser 位點(diǎn)進(jìn)行磷酸化修飾

3、磷酸化位點(diǎn)結(jié)構(gòu)

修飾名稱	修飾簡(jiǎn)寫	修飾結(jié)構(gòu)
磷酸化絲氨酸	pSer、Ser(H2PO3)
磷酸化酪氨酸	pTyr、Tyr(H2PO3)
磷酸化蘇氨酸	pThr、Thr(H2PO3)

4 、磷酸化的作用

蛋白質(zhì)磷酸化是生物界最普遍，也是最重要的一種蛋白質(zhì)翻譯后修飾，20世紀(jì)50年代以來一直被生物學(xué)家看作是一種動(dòng)態(tài)的生物調(diào)節(jié)過程。在細(xì)胞中，大概有1/3的的蛋白質(zhì)被認(rèn)為是通過磷酸化修飾的。蛋白質(zhì)的磷酸化修飾與多種生物學(xué)過程密切相關(guān)，如DNA損傷修復(fù)、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)、信號(hào)傳導(dǎo)、細(xì)胞凋亡的調(diào)節(jié)等。磷酸化蛋白質(zhì)及多肽的研究可以幫助人們闡述上述過程的機(jī)理，進(jìn)一步認(rèn)識(shí)生命活動(dòng)的本質(zhì)。近年來隨著蛋白質(zhì)組技術(shù)的不斷發(fā)展，蛋白質(zhì)磷酸化的研究越來越受到廣泛的關(guān)注。

蛋白質(zhì)磷酸化在細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中的作用

磷酸化多肽主要指肽鏈中的Ser、Tyr和Thr殘基的側(cè)鏈羥基被修飾成酸式磷酸酯多肽。磷酸化多肽是研究蛋白質(zhì)磷酸化過程的必不可少的工具，因此研究蛋白質(zhì)及多肽的磷酸化反應(yīng)并確定成熟簡(jiǎn)便的合成路線就變得非常重要。目前為止，多肽的磷酸化修飾主要有后磷酸化法和單體法兩種合成方法。后磷酸化法是多肽序列在樹脂上合成完后，再對(duì)其中的Ser、Tyr或Thr的側(cè)鏈羥基進(jìn)行磷酸化；單體法則是將適當(dāng)保護(hù)的磷酸化氨基酸直接引入到多肽序列中，這種方法較后磷酸化法操作更為簡(jiǎn)便，已經(jīng)成為多肽磷酸化修飾的主要方法。單體法修飾時(shí)，磷酸化的氨基酸由于側(cè)鏈修飾的較大基團(tuán)產(chǎn)生的位阻而導(dǎo)致難以與肽鏈縮合，并且之后的氨基酸引入都會(huì)比較困難，尤其在含有多個(gè)磷酸化位點(diǎn)修飾時(shí)，合成將變得異常困難，并且最終產(chǎn)物成分復(fù)雜，難以分離，產(chǎn)率極低。因此，當(dāng)肽鏈中多個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行磷酸化時(shí)，可以考慮采用后磷酸化法，其合成過程主要就是在多肽合成結(jié)束之后，選擇性的脫去要標(biāo)記氨基酸的側(cè)鏈保護(hù)基，對(duì)于Tyr，Thr可以直接使用側(cè)鏈不保護(hù)的氨基酸進(jìn)行反應(yīng)。側(cè)鏈保護(hù)基在1% TFA/DCM條件下可以定量的脫除。后磷酸化時(shí)，可以采用雙芐基亞磷酰胺，四氮唑生成亞磷酰胺四唑活性中間體，連接到羥基上，然后在過氧酸條件下氧化生成磷酰基，完成反應(yīng)。

成功案例（磷酸化多肽）

1、多肽序列：TDHGAEIVYK (pSer)PVVSGDT(pSer)P RHL –CONH2

2、多肽結(jié)構(gòu)：

3、HPLC圖譜：

D型氨基酸

與自然界中普遍存在的20種L型氨基酸相比，19種D型氨基酸(Gly沒有手性)往往在多肽活性和穩(wěn)定性中有著特殊作用，因此常被做為最基本的序列改造工具。

D型氨基酸可用于酶的結(jié)構(gòu)-功能分析方面的研究；用于合成多肽藥物，如多肽抗生素（阿撲西林ASPOXICILLIN），腸胃藥（OXTREOTIDE），利尿藥，腹瀉藥（善得定SANDOSTATIN ACETATE），酶抑制劑，促皮質(zhì)素類似物，止痛鎮(zhèn)痛藥，減肥藥，Ⅱ型糖尿病治療藥（那格列奈NATEGLINIDE）等。

在專肽生物的多肽合成服務(wù)中，我們專門列了這樣一個(gè)19種D型氨基酸欄目，方便大家去選擇。

{D-Ala} D-丙氨酸
{D-Arg} D-精氨酸
{D-Asp} D-天冬氨酸
{D-Asn} D-谷氨酰胺
{D-Cys} D-半胱氨酸
{D-Glu} D-谷氨酸
{D-Gln} D-谷氨酰胺
{D-His} D-組氨酸
{D-Allo-Ile} D-別異亮氨酸
{D-Leu} D-亮氨酸
{D-Lys} D-賴氨酸
{D-Met} D-甲硫氨酸
{D-Pro} D-脯氨酸
{D-Phe} D-苯丙氨酸
{D-Ser} D-絲氨酸
{D-Tyr} D-酪氨酸
{D-Thr} D-蘇氨酸
{D-Trp} D-色氨酸
{D-Val} D-纈氨酸

注：Gly甘氨酸沒有手性， Ile對(duì)應(yīng)的為D-別異亮氨酸。

成功案例（D型氨基酸）

1、產(chǎn)品序列：全D型nghqtpalqqgthssrqvtplslrsrsstfnk

2、產(chǎn)品結(jié)構(gòu)：

3、產(chǎn)品HPLC報(bào)告：

4、產(chǎn)品MS報(bào)告：

甲基化描述

甲基化修飾多肽也叫甲基化標(biāo)記多肽，甲基化修飾是蛋白質(zhì)翻譯后修飾（PTMs）的一種，幾乎參與細(xì)胞所有的生命活動(dòng)過程，發(fā)揮著重要的調(diào)控作用，蛋白質(zhì)在甲基轉(zhuǎn)移酶的催化下將甲基轉(zhuǎn)移至特定的氨基酸殘基上共價(jià)結(jié)合的過程。甲基化是一種可逆的修飾過程，由去甲基化酶催化去甲基化作用。研究發(fā)現(xiàn)，常見甲基化／去甲基化作用的氨基酸主要是賴氨酸（Lys）和精氨酸（Arg）研究表明，組蛋白賴氨酸甲基化修飾執(zhí)行著多種生物學(xué)功能，如干細(xì)胞的維持和分化、Ｘ染色體失活、轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)和ＤＮＡ損傷反應(yīng)等，主要是影響染色質(zhì)濃縮，抑制基因表達(dá)。組蛋白精氨酸甲基化在基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控中發(fā)揮著重要作用，并能影響細(xì)胞的多種生理過程，包括DNA修復(fù)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞發(fā)育及癌癥發(fā)生等因此專肽生物特地開發(fā)甲基化修飾多肽技術(shù)，為科學(xué)家在蛋白質(zhì)翻譯后修飾（PTMS）的研究中提供幫助。

根據(jù)多肽上甲基化氨基酸多肽修飾或標(biāo)記的位置可以分為：

1. N端甲基化修飾（20種L型氨基酸氨基上增加一個(gè)甲基）

2. 側(cè)鏈甲基化修飾 （Arg精氨酸甲基化多肽、Lys賴氨酸甲基化多肽）

根據(jù)甲基化修飾多肽的個(gè)數(shù)可以分為：

1. Arg(me)精氨酸單甲基修飾多肽

2. Arg(Me)2(Asymetrial)精氨酸非對(duì)稱二甲基修飾多肽

3. Arg(Me)2(Symetrical)精氨酸對(duì)稱二甲基修飾多肽

4. Lys(Me)賴氨酸單甲基修飾多肽

5. Lys(Me)2賴氨酸二甲基修飾多肽

6. Lys(Me)3賴氨酸三甲基修飾多肽

烷基化描述

修飾名稱	修飾簡(jiǎn)寫	修飾結(jié)構(gòu)
己酸	Hex-
辛酸	Oct-
癸酸	Dec-
十一烷酸	Undecyl-
十二烷酸，月桂酸	Lau-
十四烷酸，肉豆蔻酸	Myr-
十六烷酸，棕櫚酸	Pal-
十八烷酸， 硬脂酸	Ste-

同位素標(biāo)記描述

專肽生物提供同位素標(biāo)記服務(wù)，如果您想讓多肽分子量增加特定的道爾頓，我們可以根據(jù)多肽序列，為您選擇合適的同位素氨基酸。

我們將同位素氨基酸大致分為以下幾類。

1，D全標(biāo)記

2，13C,14N全標(biāo)

3，僅13C全標(biāo)記

4，α-13C單標(biāo)記

5，15N單標(biāo)記，僅標(biāo)記一

應(yīng)用：1，隨著對(duì)生長(zhǎng)抑素(somatostatin，SST)及其類似物研究的日趨深入，利用放射性核素標(biāo)記的ssT類似物與腫瘤細(xì)胞表面的生長(zhǎng)抑素受體(somatostatin receptor，ssTR)特異性結(jié)合使腫瘤顯像，從而達(dá)到定位、定性診斷的目的，已成為當(dāng)今核醫(yī)學(xué)領(lǐng)域研究的主要內(nèi)容之一。

螯合物前體多肽

放射性金屬元素，例如： Cu、 Ga、 Lu、等可以通過與富含氨基或羧基配體的螯合作用引入多肽分子，在正電子發(fā)射計(jì)算機(jī)斷層顯像（PET）技術(shù)中發(fā)揮重要的作用，被廣泛地應(yīng)用于腫瘤的診斷研究。

專肽生物可對(duì)所生產(chǎn)的多肽標(biāo)記與放射性金屬螯合的配體，滿足客戶相應(yīng)的研究需求（注：專肽生物不提供螯合放射性金屬元素的服務(wù)）。以下是一些常見的、客戶所選擇的螯合配體：

配體簡(jiǎn)寫	配體名稱	結(jié)構(gòu)
DOTA	1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷-1,4,7,10-四乙酸
NOTA	1,4,7-三氮雜環(huán)壬烷-N,N',N''-三乙酸
DTPA	二乙烯三胺五醋酸

PEG修飾簡(jiǎn)介

聚乙二醇（PEG），也稱為聚環(huán)氧乙烷（PEO），是可溶于水和大多數(shù)有機(jī)溶劑的兩親性聚醚。PEG及其衍生物是可用于由美國FDA認(rèn)證的生物藥物產(chǎn)品的少數(shù)聚合物之一。

PEG修飾是指將PEG聚合物鏈共價(jià)連接到靶分子，通常是小分子化學(xué)藥物或大生物分子如肽，蛋白質(zhì)，碳水化合物，脂質(zhì)，寡核苷酸，親和配體，輔因子，脂質(zhì)體和其他生物材料。而作為藥物先導(dǎo)化合物的多肽分子在體內(nèi)的應(yīng)用受到一定程度的限制，主要體現(xiàn)在生物體腎小球的過濾作用、體內(nèi)蛋白酶的水解破壞作用以及因多肽分子引起的體內(nèi)抗原反應(yīng)。將多肽用PEG修飾后（Pegylation），上述三方面的限制均大幅減小，從而提高了多肽在生物體內(nèi)的應(yīng)用。

專肽生物可對(duì)所合成的多肽進(jìn)行各種不同類型的PEG修飾，以滿足客戶的不同需求。主要修飾位點(diǎn)在多肽的N端、C端，Lys側(cè)鏈和Cys的巰基。修飾所用PEG單分子分子量區(qū)間在PEG2~PEG24之間；PEG大分子分子量區(qū)間在PEG500~PEG40K之間。

PEG分類	修飾簡(jiǎn)寫	細(xì)節(jié)說明	修飾位置	PEG結(jié)構(gòu)
小分子PEG	PEG2、mini-PEG、AEEA	右側(cè)可選乙酸或羧基兩種形式	肽鏈N端、C端、Lys側(cè)鏈、肽中間等
	PEG3、mini-PEG3、AEEEA	右側(cè)可選乙酸或羧基兩種形式	肽鏈N端、C端、Lys側(cè)鏈、肽中間等
	PEG4	右側(cè)可選乙酸或羧基兩種形式	肽鏈N端、C端、Lys側(cè)鏈、肽中間等
	PEG6	右側(cè)可選乙酸或羧基兩種形式	肽鏈N端、C端、Lys側(cè)鏈、肽中間等
高分子PEG	mPEG-NH2	500、550、750、1000、2000、5000等	肽鏈C端，或Asp側(cè)鏈
	NH2-PEG-NH2	1000 、2000 、3400 、5000、10000、20000、40000等	肽鏈C端，或Asp側(cè)鏈
	NH2-PEG-COOH	1000 、2000 、3400 、5000、10000、20000、40000等	肽鏈C端，或Asp側(cè)鏈
	NH2-PEG-Galactose	2000、3400、5000等	肽鏈C端，或Asp側(cè)鏈
	mPEG-COOH	500、550、750、1000、2000、5000等	N端修飾
	HO-PEG-COOH	2000、5000等	N端修飾
	COOH-PEG-COOH	550、750、1000、2000等	N端修飾

Click方法（添加疊氮、烯基、炔基、DBCO、TCO等基團(tuán)到多肽中）的介紹

點(diǎn)擊化學(xué)（Click chemistry），又稱為“鏈接化學(xué)”或“動(dòng)態(tài)組合化學(xué)，其主旨是通過小單元的拼接，來快速可靠地完成各種分子的化學(xué)合成。點(diǎn)擊化學(xué)的代表反應(yīng)為銅催化的疊氮-炔基Husigen環(huán)加成反應(yīng)。點(diǎn)擊化學(xué)在多肽化學(xué)中的應(yīng)用主要體現(xiàn)為一條肽鏈中的炔基和另一條肽鏈中的疊氮基通脫1,3-偶極環(huán)加成反應(yīng)形成三氮唑五元環(huán)結(jié)構(gòu)。此結(jié)構(gòu)能穩(wěn)固多肽與蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)，快速偶聯(lián)兩條肽鏈，同時(shí)使肽鏈的二級(jí)結(jié)構(gòu)（α-螺旋和β-折疊）發(fā)生改變來改變其生物活性。點(diǎn)擊化學(xué)的反應(yīng)條件比較接近人體的生理環(huán)境，反應(yīng)時(shí)間短，可以防止蛋白質(zhì)的變性。

點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)可分為三類：

（1） Cu（I）催化疊氮化物-炔烴點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)（CuAAC）；

（2） 菌株促進(jìn)疊氮化物-炔烴點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)（SPAAC）。它具有生物相容性。

（3） 四嗪和烯烴（反式環(huán)辛烯）之間的配位作用。這種高速反應(yīng)也是不含銅的，這是體內(nèi)細(xì)胞標(biāo)記的理想選擇。

Click Chemistry由于其溫和的條件和高的選擇性，已被廣泛用于制藥和生物技術(shù)行業(yè)的生物共軛，生物標(biāo)記和材料科學(xué)。 Click化學(xué)工具具有廣泛的功能基團(tuán)：疊氮化物，炔烴，DBCO，TCO，四嗪，BCN ...

專肽生物提供將多種Click結(jié)構(gòu)添加到多肽結(jié)構(gòu)中，以滿足廣大科研人員的實(shí)驗(yàn)要求。

分類	說明	修飾結(jié)構(gòu)	原料名稱	簡(jiǎn)寫	修飾位置
引入疊氮	疊氮化物試劑使Click Chemistry成為可能，并可用于與含胺的生物分子反應(yīng)，修飾羧酸基團(tuán)等。		2-疊氮乙酸	N3-Gly-	肽鏈N端、Lys側(cè)鏈
			5-疊氮戊酸	N3-Ava-	肽鏈N端、Lys側(cè)鏈
			6-疊氮己酸	N3-Acp-	肽鏈N端、Lys側(cè)鏈
			Lys(N3)	-Lys(N3)-、-K(N3)-	類似于氨基酸，任意位置，如N端，C端，肽段中間
引入烯基	烯基化物試劑使Click Chemistry成為可能，并可用于與含胺的生物分子反應(yīng)，修飾羧酸基團(tuán)等。		2-甲基丙烯酸	Methacryl-	肽鏈N端、Lys側(cè)鏈
			4-戊烯酸	pentenoic acid-	肽鏈N端、Lys側(cè)鏈
			5-己烯酸	5-heptenoic acid-	肽鏈N端、Lys側(cè)鏈
引入炔基	炔烴試劑可通過銅催化的疊氮化物-炔烴Click化學(xué)與含疊氮化物的化合物或生物分子反應(yīng)，以產(chǎn)生穩(wěn)定的三唑鍵。		N-炔丙基甘氨酸	N-Propargylglycine-	肽鏈N端、C端、Lys側(cè)鏈、肽的中間等
			4-戊炔酸	Pentinoyl-	肽鏈N端、Lys側(cè)鏈
			5-己炔酸	5-Hexynoic acid-	肽鏈N端、Lys側(cè)鏈
Bicyclo[6.1.0]nonyne BCN試劑	BCN試劑（雙環(huán)[6.1.0] nonyne）可以通過無銅的Click Chemistry與疊氮化物標(biāo)記的分子或生物分子反應(yīng)。		BCN試劑	BCN	\
Dibenzocyclooctyne 二苯并環(huán)辛炔	DBCO（二苯并環(huán)辛炔）試劑是用于應(yīng)變促進(jìn)的炔疊氮化物環(huán)加成（SPAAC）的最具反應(yīng)性的環(huán)炔烴之一，可實(shí)現(xiàn)無銅點(diǎn)擊化學(xué)。		二苯并環(huán)辛炔	DBCO	肽鏈N端、C端、Lys側(cè)鏈、肽的中間等
Trans-Cyclooctene Reagents 反式環(huán)辛烯試劑	TCO試劑（反式環(huán)辛烯試劑）可用于通過無銅Click Chemical標(biāo)記抗體，蛋白質(zhì)和其他大分子。		反式環(huán)辛烯試劑	TCO	肽鏈N端、Lys側(cè)鏈
Tetrazine reagents Tetrazine試劑	Tetrazine試劑可用于許多應(yīng)用，例如抗體標(biāo)記和蛋白質(zhì)修飾。發(fā)現(xiàn)川嗪以反式-環(huán)辛烯（TCO）作為親二烯體進(jìn)行生物正交反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)最快。與甲基四嗪相比，四嗪的化學(xué)穩(wěn)定性較低。		Tetrazine試劑	Tetrazine	\

成功案例（引入疊氮、烯、炔、Click運(yùn)用）

1、產(chǎn)品序列：Propargyl-PEG6-KKK-NH2

2、產(chǎn)品結(jié)構(gòu)：

3、產(chǎn)品HPLC圖譜

4、產(chǎn)品MS圖譜

生物素標(biāo)記

生物素-親合素系統(tǒng) (biotin-avidin system，BAS)，是70年代后期應(yīng)用于免疫學(xué)，并得到迅速發(fā)展的一種新型生物反應(yīng)放大系統(tǒng)。由于它具有生物素與親合素之間高度親和力及多級(jí)放大效應(yīng)，并與熒光素、酶、同位素等免疫標(biāo)記技術(shù)有機(jī)地結(jié)合，使各種示蹤免疫分析的特異性和靈敏度進(jìn)一步提高。主要有用于標(biāo)記多肽氨基的生物素N-羥基丁二酰亞胺酯(BNHS)和生物素對(duì)硝基酚酯(pBNP)，其中以BNHS最常用，當(dāng)然，也可以直接使用生物素也可以標(biāo)記，因?yàn)槠浣Y(jié)構(gòu)上有個(gè)游離的羧基，采用HBTU/HOBt/DIEA方法縮合，由于生物素的溶解度低，使用DMSO/DMF的混合溶劑增加溶解度。

此外生物素是復(fù)合維生素B2的組成部分。它與雞清蛋白、親和素、真菌蛋白、鏈霉親和素均有較高親和性和結(jié)合力。親和素和 鏈霉親和素都是四聚體蛋白，可緊緊地結(jié)合四分子D-biotin，其結(jié)合力是已知自然界中最強(qiáng)的非共價(jià)作用。生物素與親和素之間的相互作用可用于蛋白純化、檢測(cè)、固化、藥物導(dǎo)向和蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析等方面。多肽生物素標(biāo)記常在肽的N端或Lys側(cè)鏈；肽鏈 C端也可用Biotin標(biāo)記，此時(shí)肽鏈C端需引入Lys或者乙二胺結(jié)構(gòu)。

生物素標(biāo)記位置	結(jié)構(gòu)展示
多肽N端
Lys側(cè)鏈
多肽C端

成功案例（生物素標(biāo)記）

1、產(chǎn)品序列：H-Gly-LysAla-Gly-Gly-Lys-Ala-Lys-Asp-Ser-Gly-Lys-Ala-Thr-Lys(Biotin)-OH

2、產(chǎn)品結(jié)構(gòu)：

3、HPLC圖譜

4、MS圖譜

環(huán)肽（酰胺、二硫、硫酯、硫醚、酯鍵、脲基、硫脲）

專肽生物提供各種環(huán)狀多肽的定制合成服務(wù)。

成環(huán)修飾分類	成環(huán)修飾名稱	成環(huán)修飾結(jié)構(gòu)展示
酰胺成環(huán)	首尾酰胺鍵成環(huán)
	C端與中間Lys或Orn酰胺成環(huán)
	N端與中間Asp或Glu酰胺成環(huán)
	中間酰胺成環(huán)
二硫鍵成環(huán)	分子內(nèi)一對(duì)二硫鍵
	分子內(nèi)兩對(duì)二硫鍵
	分子內(nèi)三對(duì)二硫鍵
	分子間一對(duì)二硫鍵
	分子間兩對(duì)二硫鍵
酯鍵成環(huán)	普通酯鍵成環(huán)
	硫酯鍵成環(huán)
醚鍵成環(huán)	普通醚鍵成環(huán)
	硫醚鍵成環(huán)
脲基成環(huán)	普通脲基成環(huán)
	硫脲成環(huán)
CLIPS環(huán)	1-CLIPS
	2-CLIPS
	3-CLIPS

成功案例（多肽成環(huán)修飾）

1、產(chǎn)品結(jié)構(gòu)：

2、HPLC圖

3、MS圖

引入各種特殊氨基酸

為滿足科研人員對(duì)多肽的各種要求，杭州專肽生物可以將一些特殊氨基酸插入到多肽序列中，前面已有各種D型、甲基化氨基酸和同位素標(biāo)記氨基酸，此處展示其它特殊氨基酸。

特殊氨基酸的名稱	氨基酸簡(jiǎn)寫	結(jié)構(gòu)展示
硒代半胱氨酸	Sec
側(cè)鏈乙酰化賴氨酸	Lyc(Ac)
鳥氨酸	Orn
2,4-二氨基丁酸	Dab
2,3-二氨基丙酸	Dap
正亮氨酸	Nle
4-氨基丁酸	GABA
α-氨基辛二酸	Asu
苯甘氨酸	Phg
炔丙基甘氨酸 Propargylglycine	Pra
D-炔丙基甘氨酸	D-Pra
羥脯氨酸 L-Hydroxyproline	Hyp
D-羥脯氨酸 D-Hydroxyproline	D-Hyp
胍氨酸 Citrullin	Cit
D型胍氨酸 D-Citrullin	D-Cit

MAPs多聚抗原肽

多聚抗原肽(Multiple-Antigen peptide, MAP)是生產(chǎn)高效價(jià)的抗多肽抗體和多肽疫苗的一種有效方法。

杭州專肽生物根據(jù)客戶需求，幫助客戶設(shè)計(jì)并且按要求定制合成各種MAP類產(chǎn)品，所合成的產(chǎn)物純度和收率均較高。

多聚抗原肽分類	分類簡(jiǎn)寫	結(jié)構(gòu)展示
二分支	MAPs-2
四分支	MAPs-4
八分支	MAPs-8
部分多聚抗原肽的結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)問題 1，聚合度的設(shè)計(jì)，n=2-8都可以合成，n越大，合成難度也會(huì)越大。 2，支鏈部分的肽序列，可以不一樣，常見于2分支肽的兩個(gè)支鏈肽段。 3，序列中可以插入賴氨酸，通過賴氨酸側(cè)鏈引入熒光基團(tuán)（常見的5-Fam、Fitc），以達(dá)到實(shí)驗(yàn)檢測(cè)目的。   4，對(duì)于4分支肽或者8分支肽，空間位阻因素對(duì)合成的影響就體現(xiàn)出來了，通?？梢栽谥ф滊亩魏唾嚢彼岬陌被g插入 6氨基己酸，增加肽段之間的空間距離。

成功案例（分支肽）

1、產(chǎn)品序列：{(GSVHIHIIHG)2-Lys}2-Lys-Lys(5-Fam)-OH 2四分支肽

2、產(chǎn)品結(jié)構(gòu)：

3、產(chǎn)品HPLC圖譜

4、產(chǎn)品MS圖譜

KLH、BSA、OVA載體蛋白偶聯(lián)服務(wù)

多肽載體蛋白偶聯(lián)修飾用于制備抗多肽類抗體。單獨(dú)的多肽通常太小不足以激起充分的免疫反應(yīng)，而帶有很多抗原表位的載體蛋白有利于刺激輔助性T細(xì)胞，進(jìn)一步誘導(dǎo)B細(xì)胞免疫反應(yīng)。將多肽用載體蛋白修飾后，其作為一個(gè)整體來激起免疫反應(yīng)，所產(chǎn)生的抗體中有針對(duì)多肽的，有針對(duì)鏈接劑的，也有針對(duì)載體蛋白的。

最常見的載體蛋白有3種:

1）KLH (Keyhole Limpet Hemocyanin)即血藍(lán)蛋白，它是在某些軟體動(dòng)物、節(jié)肢動(dòng)物(蜘蛛和甲殼蟲)的血淋巴中發(fā)現(xiàn)的一種游離的藍(lán)色呼吸色素。血藍(lán)蛋白含兩個(gè)直接連接多肽鏈的銅離子，與含鐵的血紅蛋白類似，它易于氧結(jié)合，也易與氧解離，是已知的惟一可與氧可逆結(jié)合的銅蛋白，氧化時(shí)呈青綠色，還原時(shí)呈白色。由于KLH比BSA有更高的免疫原性，因而是最常被選用的載體蛋白。

2）BSA (Bovine Serum Albumin)，即牛血清白蛋白，它屬于最穩(wěn)定的和可溶的白蛋白。它大約有30-35個(gè)主要氨基可用于與鏈接劑發(fā)生共軛反應(yīng), 使得BSA成為一種很流行的弱抗原化合物載體蛋白。BSA的不利之處在于在很多實(shí)驗(yàn)中，它被當(dāng)作封閉劑使用，如果多肽-BSA偶聯(lián)物的抗血清用于這樣的檢測(cè)分析中，通常會(huì)出現(xiàn)假陽性，因?yàn)檫@些血清含有抗BSA的抗體。

3）OVA (Ovalbumin)，即雞卵白蛋白。它可作為第二載體蛋白去驗(yàn)證抗體是否特異性地只針對(duì)多肽而并非載體蛋白(如BSA)。

R8S5訂書肽介紹

一般來說，多肽大分子發(fā)揮其生物活性和藥理作用是通過其二級(jí)和三級(jí)結(jié)構(gòu)來實(shí)現(xiàn)的。簡(jiǎn)單的線性結(jié)構(gòu)多肽由于其構(gòu)象比較以穩(wěn)定，在發(fā)揮生物活性作用方面受到比較大的限制。針對(duì)上述問題，多肽化學(xué)家設(shè)計(jì)了Stapled Peptides，其原理是通過碳碳雙鍵，將多肽中某一特定片段序列構(gòu)象穩(wěn)定下來，以滿足特定的研究需求。Stapled Peptides一般采用S5和R8，中間間隔3個(gè)氨基酸，通過烯烴復(fù)分解反應(yīng)來形成碳碳雙鍵。專肽生物還可以開發(fā)其它類似的側(cè)鏈含烯烴結(jié)構(gòu)的特殊氨基酸，來形成其它類似的衍生物。

訂書肽的合成與普通多肽合成的區(qū)別在于在固相合成肽鏈過程中引入兩個(gè)含有α-甲基，α-烯基的非天然氨基酸，然后兩個(gè)非天然氨基酸之間發(fā)生烯烴復(fù)分解反應(yīng)環(huán)化構(gòu)成穩(wěn)定α-螺旋結(jié)構(gòu)構(gòu)象的全碳支架，進(jìn)而合成訂書肽。