生物素標(biāo)記

生物素-親合素系統(tǒng) (biotin-avidin system，BAS)，是70年代后期應(yīng)用于免疫學(xué)，并得到迅速發(fā)展的一種新型生物反應(yīng)放大系統(tǒng)。由于它具有生物素與親合素之間高度親和力及多級放大效應(yīng)，并與熒光素、酶、同位素等免疫標(biāo)記技術(shù)有機(jī)地結(jié)合，使各種示蹤免疫分析的特異性和靈敏度進(jìn)一步提高。主要有用于標(biāo)記多肽氨基的生物素N-羥基丁二酰亞胺酯(BNHS)和生物素對硝基酚酯(pBNP)，其中以BNHS最常用，當(dāng)然，也可以直接使用生物素也可以標(biāo)記，因?yàn)槠浣Y(jié)構(gòu)上有個(gè)游離的羧基，采用HBTU/HOBt/DIEA方法縮合，由于生物素的溶解度低，使用DMSO/DMF的混合溶劑增加溶解度。

此外生物素是復(fù)合維生素B2的組成部分。它與雞清蛋白、親和素、真菌蛋白、鏈霉親和素均有較高親和性和結(jié)合力。親和素和 鏈霉親和素都是四聚體蛋白，可緊緊地結(jié)合四分子D-biotin，其結(jié)合力是已知自然界中最強(qiáng)的非共價(jià)作用。生物素與親和素之間的相互作用可用于蛋白純化、檢測、固化、藥物導(dǎo)向和蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分析等方面。多肽生物素標(biāo)記常在肽的N端或Lys側(cè)鏈；肽鏈 C端也可用Biotin標(biāo)記，此時(shí)肽鏈C端需引入Lys或者乙二胺結(jié)構(gòu)。

生物素標(biāo)記位置	結(jié)構(gòu)展示
多肽N端
Lys側(cè)鏈
多肽C端

成功案例（生物素標(biāo)記）

1、產(chǎn)品序列：H-Gly-LysAla-Gly-Gly-Lys-Ala-Lys-Asp-Ser-Gly-Lys-Ala-Thr-Lys(Biotin)-OH

2、產(chǎn)品結(jié)構(gòu)：

3、HPLC圖譜

4、MS圖譜