400-998-5282
專注多肽 服務(wù)科研
編號:135890
CAS號:73032-94-7/75037-27-3/74315-46-1
單字母:H2N-SANSNPAMAPRERKAGCKNFFWKTFTSC-OH(Disulfide Bridge:C17-C28)
編號: | 135890 |
中文名稱: | 生長抑素 28、Somatostatin-28 (sheep)、Prosomatostatin |
英文名: | Somatostatin-28 (sheep)、Prosomatostatin |
CAS號: | 73032-94-7/75037-27-3/74315-46-1 |
單字母: | H2N-SANSNPAMAPRERKAGCKNFFWKTFTSC-OH(Disulfide Bridge:C17-C28) |
三字母: | H2N-Ser-Ala-Asn-Ser-Asn-Pro-Ala-Met-Ala-Pro-Arg-Glu-Arg-Lys-Ala-Gly-Cys-Lys-Asn-Phe-Phe-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Ser-Cys-OH(Disulfide Bridge:Cys17-Cys28) |
氨基酸個數(shù): | 28 |
分子式: | C137H207N41O39S3 |
平均分子量: | 3148.56 |
精確分子量: | 3146.46 |
等電點(PI): | 12.55 |
pH=7.0時的凈電荷數(shù): | 6.91 |
平均親水性: | 0.1 |
疏水性值: | -0.73 |
外觀與性狀: | 白色粉末狀固體 |
消光系數(shù): | 5500 |
來源: | 人工化學(xué)合成,僅限科學(xué)研究使用,不得用于人體。 |
純度: | 95%、98% |
鹽體系: | 可選TFA、HAc、HCl或其它 |
生成周期: | 2-3周 |
儲存條件: | 負(fù)80℃至負(fù)20℃ |
標(biāo)簽: | 二硫鍵環(huán)肽 生長抑素及類似物 |
二硫鍵廣泛存在與蛋白結(jié)構(gòu)中,對穩(wěn)定蛋白結(jié)構(gòu)具有非常重要的意義,二硫鍵一般是通過序列中的2個Cys的巰基,經(jīng)氧化形成。
形成二硫鍵的方法很多:空氣氧化法,DMSO氧化法,過氧化氫氧化法等。
二硫鍵的合成過程, 可以通過Ellman檢測以及HPLC檢測方法對其反應(yīng)進(jìn)程進(jìn)行監(jiān)測。
如果多肽中只含有1對Cys,那二硫鍵的形成是簡單的。多肽經(jīng)固相或液相合成,然后在pH8-9的溶液中進(jìn)行氧化。
當(dāng)需要形成2對或2對以上的二硫鍵時,合成過程則相對復(fù)雜。盡管二硫鍵的形成通常是在合成方案的最后階段完成,但有時引入預(yù)先形成的二硫化物是有利于連合或延長肽鏈的。通常采用的巰基保護(hù)基有trt, Acm, Mmt, tBu, Bzl, Mob, Tmob等多種基團(tuán)。我們分別列出兩種以2-Cl樹脂和Rink樹脂為載體合成的多肽上多對二硫鍵形成路線:
二硫鍵反應(yīng)條件選擇
二硫鍵即為蛋白質(zhì)或多肽分子中兩個不同位點Cys的巰基(-SH)被氧化形成的S-S共價鍵。 一條肽鏈上不同位置的氨基酸之間形成的二硫鍵,可以將肽鏈折疊成特定的空間結(jié)構(gòu)。多肽分 子通常分子量較大,空間結(jié)構(gòu)復(fù)雜,結(jié)構(gòu)中形成二硫鍵時要求兩個半胱氨酸在空間距離上接近。 此外,多肽結(jié)構(gòu)中還原態(tài)的巰基化學(xué)性質(zhì)活潑,容易發(fā)生其他的副反應(yīng),而且肽鏈上其他側(cè)鏈 也可能會發(fā)生一系列修飾,因此,肽鏈進(jìn)行修飾所選取的氧化劑和氧化條件是反應(yīng)的關(guān)鍵因素, 反應(yīng)機(jī)理也比較復(fù)雜,既可能是自由基反應(yīng),也可能是離子反應(yīng)。
反應(yīng)條件有多種選擇,比如空氣氧化,DMSO氧化等溫和的氧化過程,也可以采用H2O2,I2, 汞鹽等激烈的反應(yīng)條件。
空氣氧化法: 空氣氧化法形成二硫鍵是多肽合成中最經(jīng)典的方法,通常是將巰基處于還原態(tài)的多肽溶于水中,在近中性或弱堿性條件下(PH值6.5-10),反應(yīng)24小時以上。為了降低分子之間二硫鍵形成的可能,該方法通常需要在低濃度條件下進(jìn)行。
碘氧化法:將多肽溶于25%的甲醇水溶液或30%的醋酸水溶液中,逐滴滴加10-15mol/L的碘進(jìn)行氧化,反應(yīng)15-40min。當(dāng)肽鏈中含有對碘比較敏感的Tyr、Trp、Met和His的殘基時,氧化條件要控制的更精確,氧化完后,立即加入維生素C或硫代硫酸鈉除去過量的碘。 當(dāng)序列中有兩對或多對二硫鍵需要成環(huán)時,通常有兩種情況:
自然隨機(jī)成環(huán): 序列中的Cys之間隨機(jī)成環(huán),與一對二硫鍵成環(huán)條件相似;
定點成環(huán): 定點成環(huán)即序列中的Cys按照設(shè)計要求形成二硫鍵,反應(yīng)過程相對復(fù)雜。在 固相合成多肽之前,需要提前設(shè)計幾對二硫鍵形成的順序和方法路線,選擇不同的側(cè)鏈 巰基保護(hù)基,利用其性質(zhì)差異,分步氧化形成兩對或多對二硫鍵。 通常采用的巰基保護(hù) 基有trt, Acm, Mmt, tBu, Bzl, Mob, Tmob等多種基團(tuán)。
定義
生長抑素是由神經(jīng)內(nèi)分泌,炎癥和免疫細(xì)胞響應(yīng)不同刺激而產(chǎn)生的神經(jīng)肽。生長抑素抑制各種細(xì)胞功能,包括分泌,運動和增殖1。
相關(guān)肽
哺乳動物的大腦包含3種與促生長抑素原分子相關(guān)的肽:生長抑素14(SS14),最初從下丘腦提取物中鑒定出的形式,生長抑素28(SS28)和生長抑素28(1-12)(SS28(1-12))2。
結(jié)構(gòu)特征
合成了兩種形式的生長抑素。它們被稱為SS-14和SS-28,反映了它們的氨基酸鏈長。兩種形式的生長抑素都是通過前列腺素的蛋白水解切割而產(chǎn)生的,而前列腺素本身是由前列腺素原制成的。SS-14中的兩個半胱氨酸殘基允許該肽形成內(nèi)部二硫鍵。SS-14與SS-28分泌的相對量取決于組織。例如,SS-14是神經(jīng)系統(tǒng)中產(chǎn)生的主要形式,顯然是胰腺分泌的唯一形式,而腸道主要分泌SS-28。除了SS-14和SS-28分泌的組織特異性差異外,這種激素的兩種形式還可以具有不同的生物學(xué)效能。SS-28在抑制生長激素分泌方面的效力大約高十倍,但在抑制胰高血糖素釋放方面的效力卻比SS-14低十倍。
行動方式
已經(jīng)鑒定并鑒定了五個抑菌素受體(sst1-sst5),它們都是G蛋白偶聯(lián)受體超家族的成員。這五個受體以高親和力結(jié)合天然肽,但是只有sst2,sst5和sst3結(jié)合用于治療神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤患者的短合成類似物。這五種受體在各種正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞中表達(dá),每種受體的表達(dá)具有受體亞型和細(xì)胞類型特異性。每種受體亞型通過G蛋白依賴性和非依賴性機(jī)制與不同的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑偶聯(lián)。sst1、2和5分別抑制GH分泌,而sst2和sst5分別抑制胰高血糖素分泌和胰島素分泌1。
由各種SSTR亞型激活的不同信號通路根據(jù)受體亞型和組織定位而變化。但是,所有SSTR亞型在配體結(jié)合后均會抑制腺苷酸環(huán)化酶和cAMP的產(chǎn)生。
在所有SSTR亞型參與后被激活的第二個信號通路(SSTR1除外)是G蛋白調(diào)節(jié)的內(nèi)向整流子(GIRK或Kir3)K +通道家族的激活。這些K +通道的激活導(dǎo)致細(xì)胞膜去極化,并因此導(dǎo)致通過依賴電壓的Ca 2+通道的Ca 2+通量降低,從而導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)Ca 2+濃度降低。由于已知降低的胞質(zhì)cAMP水平和細(xì)胞內(nèi)Ca 2+濃度會誘導(dǎo)調(diào)節(jié)分泌的阻斷,因此這兩個信號通路的激活可以解釋SST對神經(jīng)遞質(zhì)和激素分泌的抑制作用。
與SST信號轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)的第三個途徑是蛋白質(zhì)磷酸酶的調(diào)控。SST激活(結(jié)合其受體)來自不同家族的許多蛋白質(zhì)磷酸酶,包括絲氨酸/蘇氨酸磷酸酶,酪氨酸磷酸酶(即SHP-1和SHP-2)和Ca 2+依賴性磷酸酶(即鈣調(diào)磷酸酶)3。
功能
生理影響:生長抑素通過內(nèi)分泌和旁分泌途徑起作用,以影響其靶細(xì)胞。大部分循環(huán)生長抑素似乎來自胰腺和胃腸道。
對垂體的影響:生長抑素被命名為抑制分泌的作用的生長激素由腦垂體。
對胰腺的影響:生長抑素似乎主要以旁分泌的方式抑制胰島素和胰高血糖素的分泌。通過抑制膽囊收縮素刺激的酶分泌和促胰液素刺激的碳酸氫鹽分泌,它也具有抑制胰腺外分泌的作用。
對胃腸道的影響:生長抑素已被證明可以抑制許多其他胃腸道激素的分泌,包括胃泌素,膽囊收縮素,促胰液素和血管活性腸肽。除抑制其他胃腸激素分泌的直接作用外,生長抑素還對胃腸道具有多種其他抑制作用,這可能反映了其對其他激素的作用,以及一些其他直接作用。生長抑素抑制胃酸和胃蛋白酶的分泌,降低胃排空率,并減少腸內(nèi)平滑肌收縮和血流。總的來說,這些活動似乎具有降低營養(yǎng)吸收速率的總體效果。
對神經(jīng)系統(tǒng)的影響:生長抑素通常被稱為在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)具有神經(jīng)調(diào)節(jié)活性,并且似乎對神經(jīng)傳遞具有多種復(fù)雜的作用。將生長抑素注射到嚙齒動物的大腦中會導(dǎo)致諸如刺激覺增加和睡眠減少以及某些運動反應(yīng)受損等情況。
藥理用途:生長抑素及其合成類似物在臨床上用于治療各種腫瘤。由于其抑制生長激素分泌的能力,它也被用于治療巨人癥和肢端肥大癥。
生長抑素類似物:奧曲肽已在大多數(shù)國家/地區(qū)注冊用于控制 胃腸道和胰腺 NET(神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤)以及肢端肥大癥患者的激素癥狀。緩釋肌內(nèi) 奧曲肽(善寧LAR的(IM)制劑®)通常 施用一次,每4周,和蘭瑞肽的(Somatuline ® LA)是每2周一次給予。
腫瘤和轉(zhuǎn)移而承受SST 2或SST 5可以顯現(xiàn)體內(nèi)后放射性標(biāo)記的八肽的注射類似物諸如111的In-pentetreotide [OctreoScan ®([ 111在-DTPA0]奧曲肽)]和[ 111在-DOTA0]蘭瑞肽。放射性標(biāo)記的八肽類似物,如111的In-pentetreotide [ 90 Y型DOTA0,Tyr3]奧曲肽(OctreoTher ®),[ 177路-DOTA0Tyr3]奧曲肽,[ 111在-DOTA0]蘭瑞肽和[ 90 Y型DOTA0]蘭瑞肽,也可以是用于放射治療 sst 2和sst 5陽性晚期或轉(zhuǎn)移性內(nèi)分泌 腫瘤4。
參考
1. Benali N, Ferjoux G, Puente E, Buscail L, Susini C (2000). Somatostatin Receptors. Digestion,62:27-32.
2. Morrison JH, Benoit R, Magistretti PJ, Bloom FE (1983). Immunohistochemical distribution of pro-somatostatin-related peptides in cerebral cortex. Brain Res., 62(2):344-351.
3. Sitton NB (2006). Somatostatin and the Somatostatin Receptors: Versatile Regulators of Biological Activity. Pathways, 2:25-27.
4. Oberg K, Kvols L, Caplin M, Delle Fave G, de Herder W, Rindi G, Ruszniewski P, Woltering EA, Wiedenmann B (2004). Consensus report on the use of somatostatin analogs for the management of neuroendocrine tumors of the gastroenteropancreatic system. Ann Oncol.,15(6):966-973.