P物質(zhì)（SP）是一種重要的神經(jīng)肽，屬于速激肽家族。它充當(dāng)神經(jīng)遞質(zhì)和神經(jīng)調(diào)節(jié)劑。它與神經(jīng)激肽A密切相關(guān)，兩者都起源于相同的前體前體原胰凝乳蛋白酶A。它從感覺神經(jīng)末梢釋放，參與炎癥和疼痛過程。該肽是熒光（FAM）標(biāo)記的物質(zhì)P，Abs/Em=494/521nm。

Substance P (SP) is an important neuropeptide belonging to the tachykinin family. It acts as a neurotransmitter and neuromodulator. It is closely related to neurokinin A, both originating from the same precursor preprotachykinin A. It is released from the terminals of sensory nerves and is involved in inflammation and pain processes. This peptide is a fluorescent (FAM)-labeled Substance P, Abs/Em = 494/521 nm.

多肽熒光標(biāo)記由于沒有放射性，實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)單。因此，目前在生物學(xué)研究中多肽熒光標(biāo)記應(yīng)用非常廣泛，多肽熒光標(biāo)記方法與熒光試劑的結(jié)構(gòu)有關(guān)系，對(duì)于有游離羧基的采用的方法與接多肽反應(yīng)相同，也采用HBTU/HOBt/DIEA方法連接。 在N端標(biāo)記FITC的多肽需經(jīng)歷環(huán)化作用來形成熒光素，通常會(huì)伴有最后一個(gè)氨基酸的去除，但當(dāng)有一個(gè)間隔器如氨基己酸，或者是通過非酸性環(huán)境將目的多肽從樹脂上切下來時(shí)，這種情況可避免在切割的過程中被TFA切割掉。
        人們利用利用熒光標(biāo)記的多肽來檢測(cè)目標(biāo)蛋白的活性，并將 其發(fā)展的高通量活性篩選方法應(yīng)用于疾病治療靶點(diǎn)蛋白的藥物篩選和藥物開發(fā)（例如，各種激 酶、磷酸酶、肽酶等）。
        專肽生物能夠提供技術(shù)成熟的各種熒光標(biāo)記多肽。
 

下面是一些常見的多肽修飾熒光物質(zhì)結(jié)構(gòu)：




FITC標(biāo)記
 

      FITC(異硫氰酸熒光素)具有比較高的活性，我們公司可以通過兩種方式將FITC標(biāo)記于多肽 上：(1) 將FITC標(biāo)記于賴氨酸（Lys）或被選擇性地脫保護(hù)的鳥氨酸（ornithine）側(cè)鏈氨基 上；(2) 將FITC標(biāo)記于多肽N端氨基。

      當(dāng)在N端標(biāo)記時(shí)，建議在最后一個(gè)氨基和由異硫氰酸酯與氨基反應(yīng)產(chǎn)生的硫脲鍵之間引入 烷基間隔器（alkyl spacer），如氨基己酸（Ahx）。鏈接切割需要酸性環(huán)境，在N端標(biāo)記FITC 的多肽需經(jīng)歷環(huán)化作用來形成熒光素，通常會(huì)伴有最后一個(gè)氨基酸的去除，但當(dāng)有一個(gè)間隔器 如氨基己酸，或者是通過非酸性環(huán)境將目的肽從樹脂上切下來時(shí)，這種情況可避免。空間位阻 被認(rèn)為是在熒光染料前使用Ahx的主要原因，而不是為什么FITC不能直接偶聯(lián)在多肽上的原因。

      Ahx或b-Ala均可作為間隔器用于FITC標(biāo)記的多肽上。

普通熒光修飾

通過Lys側(cè)鏈氨基連接的熒光修飾

專肽常做的熒光物質(zhì)的激發(fā)光波長和發(fā)射光波長?？晒﹨⒖歼x擇：
 

定義
神經(jīng)肽的長度為3-40個(gè)氨基酸，可作為神經(jīng)遞質(zhì)。它們廣泛分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng)和周圍神經(jīng)系統(tǒng)。

發(fā)現(xiàn)
神經(jīng)肽是由約翰·休斯博士和科斯特里茨博士于1975年發(fā)現(xiàn)的。它們是內(nèi)啡肽，內(nèi)在產(chǎn)生的嗎啡樣物質(zhì)，會(huì)在體內(nèi)產(chǎn)生一系列類似藥物的作用?？梢詮男蛄行畔?中鑒定神經(jīng)肽前體mRNA序列，并且得到的翻譯蛋白序列包括信號(hào)肽序列和一個(gè)或多個(gè)神經(jīng)肽。廣泛而復(fù)雜的一系列酶處理步驟，包括被激素或前蛋白轉(zhuǎn)化酶切割以及其他翻譯后修飾，在創(chuàng)建活性神經(jīng)肽之前就發(fā)生在翻譯后的蛋白質(zhì)序列上  2,3。

結(jié)構(gòu)特征
通過核磁共振（NMR）光譜研究了幾種來自軟體動(dòng)物的類似神經(jīng)肽的構(gòu)象性質(zhì)。肽的N末端可變區(qū)中的氨基酸取代對(duì)溶液中反向轉(zhuǎn)化的種群具有顯著影響。通過使用兩個(gè)獨(dú)立的NMR參數(shù)測(cè)得的轉(zhuǎn)彎數(shù)，發(fā)現(xiàn)使用Helix aspersa的受體膜制劑與IC50值高度相關(guān)（r2 = 0.93和0.82）。這些結(jié)果表明，構(gòu)象集合降低了特定肽相對(duì)于特定受體4,5的有效濃度。

神經(jīng)肽Y與人肽相同，并且與禽胰多肽高度同源。神經(jīng)肽Y和禽胰多肽之間的同源性保留了維持三級(jí)結(jié)構(gòu)必不可少的所有殘基。結(jié)果表明，神經(jīng)肽保留了緊湊的三級(jí)結(jié)構(gòu)，其特征是在N末端的聚脯氨酸II類螺旋和C末端的a螺旋 6之間廣泛的疏水相互作用。

已經(jīng)通過許多孤兒受體之一發(fā)現(xiàn)了一些肽，這些受體是內(nèi)源性配體未知的受體，例如“類阿片受體樣1”（ORL1）。隨后，已闡明該ORL1受體的內(nèi)源性激動(dòng)劑的結(jié)構(gòu)，一種稱為孤兒蛋白FQ或傷害感受蛋白的17個(gè)氨基酸的肽7。

行動(dòng)方式
神經(jīng)肽是由神經(jīng)元作為細(xì)胞間信使釋放的肽。一些神經(jīng)肽充當(dāng)神經(jīng)遞質(zhì)，而另一些充當(dāng)激素。神經(jīng)肽既可以為我們提供支持，也可以為我們提供幫助?？寡咨窠?jīng)肽可幫助我們減少皮膚發(fā)炎。神經(jīng)肽是自然產(chǎn)生的，可以在非常有限的時(shí)間內(nèi)與靶細(xì)胞膜受體在明確的作用位點(diǎn)相互作用。因此，大多數(shù)這些內(nèi)源性化合物的特征在于低的生物屏障滲透性和非常高的酶促降解敏感性。腦室內(nèi)或全身注射神經(jīng)肽Y（NPY）可使cast割的雌性大鼠血漿中的促黃體生成激素（LH）水平降低。6。

功能

生物功能，神經(jīng)肽控制著我們的情緒，能量水平，痛苦和愉悅感，體重以及解決問題的能力；它們還會(huì)形成記憶，情感行為，食欲和發(fā)炎，修復(fù)疤痕和皺紋并調(diào)節(jié)我們的免疫系統(tǒng)。這些活躍的大腦小信使實(shí)際上打開了皮膚7的細(xì)胞功能。因此，今天，與神經(jīng)肽系統(tǒng)相互作用的藥物設(shè)計(jì)是后基因組藥物化學(xué)研究最廣泛的途徑之一。

P物質(zhì)已被確定為負(fù)責(zé)傷害性信號(hào)傳遞的主要神經(jīng)肽。內(nèi)源性阿片類藥物是天然神經(jīng)肽，負(fù)責(zé)傷害性信號(hào)的調(diào)節(jié)（通常是抑制）。

免疫系統(tǒng)，當(dāng)它們被分泌時(shí)，它們會(huì)激活自然殺傷細(xì)胞（NK細(xì)胞），從而增強(qiáng)我們的免疫系統(tǒng)。

隨著內(nèi)啡肽的分泌越來越多，血管病變使收縮的血管恢復(fù)到正常狀態(tài)，使血液以正常方式流動(dòng)。大多數(shù)成人疾病都始于血管堵塞。內(nèi)啡肽有助于改善血液循環(huán)。

內(nèi)啡肽通過去除超氧化物具有抗衰老作用。從呼吸進(jìn)入人體的氧氣可以轉(zhuǎn)變?yōu)槌趸?。這是造成人類疾病和衰老的最大敵人之一。

抗壓力激素，應(yīng)對(duì)壓力的能力與我們體內(nèi)的內(nèi)啡肽水平成正比。

緩解疼痛的作用是，我們的神經(jīng)系統(tǒng)在接收到疼痛信號(hào)時(shí)會(huì)分泌神經(jīng)遞質(zhì)。一旦內(nèi)啡肽在疼痛的那一刻被釋放，內(nèi)啡肽就會(huì)與神經(jīng)元上的內(nèi)啡肽受體結(jié)合，從而阻止第一種神經(jīng)遞質(zhì)被分泌出來。

記憶力，神經(jīng)肽可以改善記憶力，因?yàn)樗鼈兛梢允鼓X細(xì)胞保持年輕健康。

參考

1.     Hummon AB, Richmond TA, Verleyen P, Baggerman G, Huybrechts J, Ewing MA, Vierstraete E, Rodriguez-Zas SL, Liliane SL, Robinson GE (2006). From the genome to the proteome: uncovering peptides in the Apis brain. Science, 27(314):647-649.

2.     Rockwell NC, Krysan DJ, Komiyama T, Fuller RS (2002). Precursor processing by Kex2/Furin Proteases. Chem. Rev., 102:4525–4548.

3.     Von ER, Beck-Sickinger AG (2004). Biosynthesis of peptide hormones derived from precursor sequences. Curr. Med. Chem.,11:2651–2665.

4.     Edison AS, Espinoza E, Zachariah C (1999). Conformational Ensembles: The Role of Neuropeptide Structures in Receptor Binding. The Journal of Neuroscience., 19(15):6318-6326.

5.     Payza K, Greenberg MJ, Price DA (1989). Further characterization of Helix FMRFamide receptors: kinetics, tissue distribution, and interactions with the endogenous heptapeptides. Peptides, 10:657-661.

6.     Allen J, Novotný J, Martin J, Heinrich G (1987). Molecular structure of mammalian neuropeptide Y: Analysis by molecular cloning and computer-aided comparison with crystal structure of avian homologue. PNAS., 84:2532-2536.

7.     Guya J, Lia S,  Pelletier G (1988). Studies on the physiological role and mechanism of action of neuropeptide Y in the regulation of luteinizing hormone secretion in the rat. Regulatory Peptides., 23(2):209-216.