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多肽產(chǎn)品

1816258-59-9,甲狀旁腺激素 Biotin-PTH-Related Protein (1-34)(human rat,Biotin-Ala-Val-Ser-Glu-His-Gln-Leu-Leu-His-Asp-Lys-Gly-Lys-Ser-Ile-Gln-Asp-Leu-Arg-Arg-Arg-Phe-Phe-Leu-His-His-Leu-Ile-Ala-Glu-Ile-His-Thr-Ala-COOH,Biotin-AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRFFLHHLIAEIHTA-OH,杭州專肽生物的產(chǎn)品

甲狀旁腺激素 Biotin-PTH-Related Protein (1-34)(human rat

編號:162726

CAS號:1816258-59-9

單字母:Biotinyl-AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRFFLHHLIAEIHTA-OH

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  • 編號:162726
    中文名稱:甲狀旁腺激素 Biotin-PTH-Related Protein (1-34)(human rat
    英文名:Biotin-Parathyroid Hormone-Related Protein (1-34)h
    CAS號:1816258-59-9
    單字母:Biotinyl-AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRFFLHHLIAEIHTA-OH
    三字母:Biotinyl

    N端生物素標(biāo)記

    -Ala

    丙氨酸

    -Val

    纈氨酸

    -Ser

    絲氨酸

    -Glu

    谷氨酸

    -His

    組氨酸

    -Gln

    谷氨酰胺

    -Leu

    亮氨酸

    -Leu

    亮氨酸

    -His

    組氨酸

    -Asp

    天冬氨酸

    -Lys

    賴氨酸

    -Gly

    甘氨酸

    -Lys

    賴氨酸

    -Ser

    絲氨酸

    -Ile

    異亮氨酸

    -Gln

    谷氨酰胺

    -Asp

    天冬氨酸

    -Leu

    亮氨酸

    -Arg

    精氨酸

    -Arg

    精氨酸

    -Arg

    精氨酸

    -Phe

    苯丙氨酸

    -Phe

    苯丙氨酸

    -Leu

    亮氨酸

    -His

    組氨酸

    -His

    組氨酸

    -Leu

    亮氨酸

    -Ile

    異亮氨酸

    -Ala

    丙氨酸

    -Glu

    谷氨酸

    -Ile

    異亮氨酸

    -His

    組氨酸

    -Thr

    蘇氨酸

    -Ala

    丙氨酸

    -OH

    C端羧基

    氨基酸個(gè)數(shù):34
    分子式:C190H301N59O50S1
    平均分子量:4243.85
    精確分子量:4241.25
    等電點(diǎn)(PI):10.76
    pH=7.0時(shí)的凈電荷數(shù):2.18
    酸性基團(tuán)個(gè)數(shù):pH=7.0時(shí)的凈電荷數(shù):0.50
    堿性基團(tuán)個(gè)數(shù):平均親水性:親水
    平均親水性:0.081818181818182
    疏水性值:-0.39
    外觀與性狀:白色粉末狀固體
    消光系數(shù):-
    來源:人工化學(xué)合成,僅限科學(xué)研究使用,不得用于人體。
    純度:95%、98%
    鹽體系:可選TFA、HAc、HCl或其它
    儲存條件:負(fù)80℃至負(fù)20℃
    標(biāo)簽:生物素標(biāo)記肽(Biotinyl)   

  • 專肽生物合成用于蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用研究的生物素化肽。盡管生物素可以在 N 端或 C 端引入(通過賴氨酸殘基),但我們建議使用 N 端修飾,因?yàn)樗杀镜?、成功率高、周轉(zhuǎn)時(shí)間短且易于操作。因?yàn)槎嚯暮铣墒菑?C 端到 N 端合成的,因此,N 端修飾是 SPPS步驟的最后一步,不需要額外的特定縮合步驟。相比之下,C 端修飾需要額外的步驟,并且通常更復(fù)雜。當(dāng)然,原則上生物素可以定位在任何地方。

    生物素可以通過多種不同的接頭或間隔物與肽分離。盡管如此,還是建議包含一個(gè)靈活的間隔物,例如 Ahx(一個(gè) 6 碳接頭),以使生物素標(biāo)簽更加穩(wěn)定或靈活。

    專肽生物在 N 端或 C 端提供生物素化:生物素-N 端、賴氨酸-生物素-肽中間和賴氨酸-生物素-C 端。
    專肽生物還可以使用 Ahx 接頭或長碳 (LC) 接頭提供生物素化:生物素-Ahx-N 末端、Lys-Ahx-生物素-肽中間、Lys-Ahx-生物素-C-末端。

    (生物素結(jié)構(gòu))

    示例:
    GRGDS在N端和C端標(biāo)記生物素的結(jié)構(gòu)展示。

    1、GRGDS在N端標(biāo)記生物素,不增加Ahx 接頭

    2、GRGDS在N端標(biāo)記生物素,增加一個(gè)Ahx 接頭


    3、GRGDS在C端標(biāo)記生物素,不增加Ahx 接頭

    4、GRGDS在C端標(biāo)記生物素,增加一個(gè)Ahx 接頭。

  • DOI名稱
    10.1046/j.1469-7580.2002.00078.xExpression of parathyroid hormone-related peptide (PthrP) and its receptor (PTH1R) during the histogenesis of cartilage and bone in the chicken mandibular process下載
  • 多肽Biotin-Ala-Val-Ser-Glu-His-Gln-Leu-Leu-His-Asp-Lys-Gly-Lys-Ser-Ile-Gln-Asp-Leu-Arg-Arg-Arg-Phe-Phe-Leu-His-His-Leu-Ile-Ala-Glu-Ile-His-Thr-Ala-COOH的合成步驟:

    1、合成CTC樹脂:稱取1.83g CTC Resin(如初始取代度約為1.05mmol/g)和2.31mmol Fmoc-Ala-OH于反應(yīng)器中,加入適量DCM溶解氨基酸(需要注意,此時(shí)CTC樹脂體積會增大好幾倍,避免DCM溶液過少),再加入5.76mmol DIPEA(Mw:129.1,d:0.740g/ml),反應(yīng)2-3小時(shí)后,可不抽濾溶液,直接加入1ml的HPLC級甲醇,封端半小時(shí)。依次用DMF洗滌2次,甲醇洗滌1次,DCM洗滌一次,甲醇洗滌一次,DCM洗滌一次,DMF洗滌2次(這里使用甲醇和DCM交替洗滌,是為了更好地去除其他溶質(zhì),有利于后續(xù)反應(yīng))。得到  Fmoc-Ala-CTC Resin。結(jié)構(gòu)圖如下:

    2、脫Fmoc:加3倍樹脂體積的20%Pip/DMF溶液,鼓氮?dú)?0分鐘,然后2倍樹脂體積的DMF 洗滌5次。得到 H2N-Ala-CTC Resin 。(此步驟脫除Fmoc基團(tuán),茚三酮檢測為藍(lán)色,Pip為哌啶)。結(jié)構(gòu)圖如下:

    3、縮合:取5.76mmol Fmoc-Thr(tBu)-OH 氨基酸,加入到上述樹脂里,加適當(dāng)DMF溶解氨基酸,再依次加入11.53mmol DIPEA,5.48mmol HBTU。反應(yīng)30分鐘后,取小樣洗滌,茚三酮檢測為無色。用2倍樹脂體積的DMF 洗滌3次樹脂。(洗滌樹脂,去掉殘留溶劑,為下一步反應(yīng)做準(zhǔn)備)。得到Fmoc-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin。氨基酸:DIPEA:HBTU:樹脂=3:6:2.85:1(摩爾比)。結(jié)構(gòu)圖如下:

    4、依次循環(huán)步驟二、步驟三,依次得到

    H2N-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    Fmoc-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    H2N-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    Fmoc-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    H2N-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    Fmoc-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    H2N-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    Fmoc-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    H2N-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    Fmoc-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    H2N-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    Fmoc-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    H2N-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    Fmoc-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    H2N-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    Fmoc-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    H2N-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    Fmoc-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    H2N-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    Fmoc-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    H2N-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    Fmoc-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    H2N-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    Fmoc-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    H2N-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    H2N-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    Fmoc-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    H2N-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    Fmoc-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    H2N-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    Fmoc-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    H2N-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    Fmoc-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    H2N-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    Fmoc-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    H2N-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    Fmoc-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    H2N-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    Fmoc-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    H2N-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    Fmoc-Gly-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    H2N-Gly-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    Fmoc-Lys(Boc)-Gly-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    H2N-Lys(Boc)-Gly-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    Fmoc-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gly-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    H2N-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gly-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    Fmoc-His(Trt)-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gly-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    H2N-His(Trt)-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gly-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    Fmoc-Leu-His(Trt)-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gly-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    H2N-Leu-His(Trt)-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gly-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    Fmoc-Leu-Leu-His(Trt)-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gly-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    H2N-Leu-Leu-His(Trt)-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gly-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    Fmoc-Gln(Trt)-Leu-Leu-His(Trt)-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gly-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    H2N-Gln(Trt)-Leu-Leu-His(Trt)-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gly-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    Fmoc-His(Trt)-Gln(Trt)-Leu-Leu-His(Trt)-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gly-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    H2N-His(Trt)-Gln(Trt)-Leu-Leu-His(Trt)-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gly-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    Fmoc-Glu(OtBu)-His(Trt)-Gln(Trt)-Leu-Leu-His(Trt)-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gly-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    H2N-Glu(OtBu)-His(Trt)-Gln(Trt)-Leu-Leu-His(Trt)-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gly-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    Fmoc-Ser(tBu)-Glu(OtBu)-His(Trt)-Gln(Trt)-Leu-Leu-His(Trt)-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gly-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    H2N-Ser(tBu)-Glu(OtBu)-His(Trt)-Gln(Trt)-Leu-Leu-His(Trt)-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gly-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    Fmoc-Val-Ser(tBu)-Glu(OtBu)-His(Trt)-Gln(Trt)-Leu-Leu-His(Trt)-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gly-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    H2N-Val-Ser(tBu)-Glu(OtBu)-His(Trt)-Gln(Trt)-Leu-Leu-His(Trt)-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gly-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    Fmoc-Ala-Val-Ser(tBu)-Glu(OtBu)-His(Trt)-Gln(Trt)-Leu-Leu-His(Trt)-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gly-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin

    以上中間結(jié)構(gòu),均可在專肽生物多肽計(jì)算器-多肽結(jié)構(gòu)計(jì)算器中,一鍵畫出。

    最后再經(jīng)過步驟二得到 H2N-Ala-Val-Ser(tBu)-Glu(OtBu)-His(Trt)-Gln(Trt)-Leu-Leu-His(Trt)-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gly-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTC Resin,結(jié)構(gòu)如下:

    5、生物素反應(yīng)連接:在上述樹脂中,加入適當(dāng)DMF后,再加入5.76mmol 生物素到樹脂中,再加入11.53mmol DIPEA、5.48mmol HBTU,鼓氮?dú)夥磻?yīng)30分鐘。用2倍樹脂體積的DMF 洗滌3次樹脂(洗滌樹脂,去掉殘留溶劑,為下一步反應(yīng)做準(zhǔn)備)。 得到Biotin-Ala-Val-Ser(tBu)-Glu(OtBu)-His(Trt)-Gln(Trt)-Leu-Leu-His(Trt)-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Gly-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asp(OtBu)-Leu-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Arg(Pbf)-Phe-Phe-Leu-His(Trt)-His(Trt)-Leu-Ile-Ala-Glu(OtBu)-Ile-His(Trt)-Thr(tBu)-Ala-CTCResin。 結(jié)構(gòu)如下:

    6、切割:6倍樹脂體積的切割液(或每1g樹脂加8ml左右的切割液),搖床搖晃 2小時(shí),過濾掉樹脂,用冰無水乙醚沉淀濾液,并用冰無水乙醚洗滌沉淀物3次,最后將沉淀物放真空干燥釜中,常溫干燥24小試,得到粗品Biotin-Ala-Val-Ser-Glu-His-Gln-Leu-Leu-His-Asp-Lys-Gly-Lys-Ser-Ile-Gln-Asp-Leu-Arg-Arg-Arg-Phe-Phe-Leu-His-His-Leu-Ile-Ala-Glu-Ile-His-Thr-Ala-COOH。結(jié)構(gòu)圖見產(chǎn)品結(jié)構(gòu)圖。

    切割液選擇:1)TFA:H2O=95%:5%

    2)TFA:H2O:TIS=95%:2.5%:2.5%

    3)三氟乙酸:茴香硫醚:1,2-乙二硫醇:苯酚:水=87.5%:5%:2.5%:2.5%:2.5%

    (前兩種適合沒有容易氧化的氨基酸,例如Trp、Cys、Met。第三種適合幾乎所有的序列。)

    6、純化凍干:使用液相色譜純化,收集目標(biāo)峰液體,進(jìn)行凍干,獲得蓬松的粉末狀固體多肽。不過這時(shí)要取小樣復(fù)測下純度 是否目標(biāo)純度。

    7、最后總結(jié):

    杭州專肽生物技術(shù)有限公司(ALLPEPTIDE http://amynixphotography.com)主營定制多肽合成業(yè)務(wù),提供各類長肽,短肽,環(huán)肽,提供各類修飾肽,如:熒光標(biāo)記修飾(CY3、CY5、CY5.5、CY7、FAM、FITC、Rhodamine B、TAMRA等),功能基團(tuán)修飾肽(疊氮、炔基、DBCO、DOTA、NOTA等),同位素標(biāo)記肽(N15、C13),訂書肽(Stapled Peptide),脂肪酸修飾肽(Pal、Myr、Ste),磷酸化修飾肽(P-Ser、P-Thr、P-Tyr),環(huán)肽(酰胺鍵環(huán)肽、一對或者多對二硫鍵環(huán)),生物素標(biāo)記肽,PEG修飾肽,甲基化修飾肽等。

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