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鮭魚 GnRH 對(duì)胎盤 GnRH 受體的親和力是其哺乳動(dòng)物類似物的兩倍。
編號(hào):133634
CAS號(hào):51230-19-4
單字母:Pyr-HWSYaLRPG-CONH2
編號(hào): | 133634 |
中文名稱: | 黃體生成素釋放激素[DAla6]LHRH |
英文名: | [DAla6]LHRH |
英文同義詞: | (D-Ala6)-GnRH; (D-Ala6)-Gonadorelin |
CAS號(hào): | 51230-19-4 |
單字母: | Pyr-HWSYaLRPG-CONH2 |
三字母: | Pyr 焦谷氨酸 -His組氨酸 -Trp色氨酸 -Ser絲氨酸 -Tyr酪氨酸 -DAlaD型丙氨酸 -Leu亮氨酸 -Arg精氨酸 -Pro脯氨酸 -Gly甘氨酸 -CONH2C端酰胺化 |
氨基酸個(gè)數(shù): | 9 |
分子式: | C56H77N17O13 |
平均分子量: | 1196.32 |
精確分子量: | 1195.59 |
等電點(diǎn)(PI): | - |
pH=7.0時(shí)的凈電荷數(shù): | 2.24 |
酸性基團(tuán)個(gè)數(shù): | 1.1 |
堿性基團(tuán)個(gè)數(shù): | 疏水 |
平均親水性: | -0.9 |
疏水性值: | -0.74 |
外觀與性狀: | 白色粉末狀固體 |
消光系數(shù): | 6990 |
來(lái)源: | 人工化學(xué)合成,僅限科學(xué)研究使用,不得用于人體。 |
純度: | 95%、98% |
鹽體系: | 可選TFA、HAc、HCl或其它 |
儲(chǔ)存條件: | 負(fù)80℃至負(fù)20℃ |
標(biāo)簽: | D型氨基酸肽 |
鮭魚 GnRH 對(duì)胎盤 GnRH 受體的親和力是其哺乳動(dòng)物類似物的兩倍。
Salmon GnRH showed a twofold greater affinity for the placental GnRH receptor than its mammalian analog.
很多蛋白在細(xì)胞中非常容易被降解,或被標(biāo)記,進(jìn)而被選擇性地破壞。但含有部分D型氨基酸的多肽則顯示了很強(qiáng)的抵抗蛋白酶降解能力。
DOI | 名稱 | |
---|---|---|
10.1111/j.1399-3011.1998.tb01475.x | Interaction of gonadotropin-releasing hormone and its agonist analogs with Ca2+ in a nonpolar milieu. Correlation with biopotencies | 下載 |
多肽Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-DAla-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2的合成步驟:
1、合成MBHA樹脂:取若干克MBHA樹脂(如初始取代度為0.5mmol/g)和1倍樹脂摩爾量的Fmoc-Linker-OH加入到反應(yīng)器中,加入DMF,攪拌使氨基酸完全溶解。再加入樹脂2倍量的DIEPA,攪拌混合均勻。再加入樹脂0.95倍量的HBTU,攪拌混合均勻。反應(yīng)3-4小時(shí)后,用DMF洗滌3次。用2倍樹脂體積的10%乙酸酐/DMF 進(jìn)行封端30分鐘。然后再用DMF洗滌3次,甲醇洗滌2次,DCM洗滌2次,再用甲醇洗滌2次。真空干燥12小時(shí)以上,得到干燥的樹脂{Fmoc-Linker-MHBA Resin},測(cè)定取代度。這里測(cè)得取代度為 0.3mmol/g。結(jié)構(gòu)如下圖:
2、脫Fmoc:取1.01g的上述樹脂,用DCM或DMF溶脹20分鐘。用DMF洗滌2遍。加3倍樹脂體積的20%Pip/DMF溶液,鼓氮?dú)?0分鐘,然后2倍樹脂體積的DMF 洗滌5次。得到 H2N-Linker-MBHA Resin 。(此步驟脫除Fmoc基團(tuán),茚三酮檢測(cè)為藍(lán)色,Pip為哌啶)。結(jié)構(gòu)圖如下:
3、縮合:取0.91mmol Fmoc-Gly-OH 氨基酸,加入到上述樹脂里,加適當(dāng)DMF溶解氨基酸,再依次加入1.82mmol DIPEA,0.86mmol HBTU。反應(yīng)30分鐘后,取小樣洗滌,茚三酮檢測(cè)為無(wú)色。用2倍樹脂體積的DMF 洗滌3次樹脂。(洗滌樹脂,去掉殘留溶劑,為下一步反應(yīng)做準(zhǔn)備)。得到Fmoc-Gly-Linker-MBHA Resin。氨基酸:DIPEA:HBTU:樹脂=3:6:2.85:1(摩爾比)。結(jié)構(gòu)圖如下:
4、依次循環(huán)步驟二、步驟三,依次得到
H2N-Gly-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Pro-Gly-Linker-MBHA Resin
H2N-Pro-Gly-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Arg(Pbf)-Pro-Gly-Linker-MBHA Resin
H2N-Arg(Pbf)-Pro-Gly-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-Linker-MBHA Resin
H2N-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-Linker-MBHA Resin
Fmoc-DAla-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-Linker-MBHA Resin
H2N-DAla-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Tyr(tBu)-DAla-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-Linker-MBHA Resin
H2N-Tyr(tBu)-DAla-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-DAla-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-Linker-MBHA Resin
H2N-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-DAla-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-Linker-MBHA Resin
Fmoc-Trp(Boc)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-DAla-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-Linker-MBHA Resin
H2N-Trp(Boc)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-DAla-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-Linker-MBHA Resin
Fmoc-His(Trt)-Trp(Boc)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-DAla-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-Linker-MBHA Resin
以上中間結(jié)構(gòu),均可在專肽生物多肽計(jì)算器-多肽結(jié)構(gòu)計(jì)算器中,一鍵畫出。
最后再經(jīng)過(guò)步驟二得到 H2N-His(Trt)-Trp(Boc)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-DAla-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-Linker-MBHA Resin,結(jié)構(gòu)如下:
5、焦谷氨酸反應(yīng)連接:在上述樹脂中,加入適當(dāng)DMF后,再加入0.91mmol 焦谷氨酸到樹脂中,再加入1.82mmol DIPEA、0.86mmol HBTU,鼓氮?dú)夥磻?yīng)30分鐘。用2倍樹脂體積的DMF 洗滌3次樹脂(洗滌樹脂,去掉殘留溶劑,為下一步反應(yīng)做準(zhǔn)備)。 得到Pyr-His(Trt)-Trp(Boc)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-DAla-Leu-Arg(Pbf)-Pro-Gly-Linker-MBHAResin。 結(jié)構(gòu)如下:
5、切割:6倍樹脂體積的切割液(或每1g樹脂加8ml左右的切割液),搖床搖晃 2小時(shí),過(guò)濾掉樹脂,用冰無(wú)水乙醚沉淀濾液,并用冰無(wú)水乙醚洗滌沉淀物3次,最后將沉淀物放真空干燥釜中,常溫干燥24小試,得到粗品Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-DAla-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2。結(jié)構(gòu)圖見(jiàn)產(chǎn)品結(jié)構(gòu)圖。
切割液選擇:1)TFA:H2O=95%:5%
2)TFA:H2O:TIS=95%:2.5%:2.5%
3)三氟乙酸:茴香硫醚:1,2-乙二硫醇:苯酚:水=87.5%:5%:2.5%:2.5%:2.5%
(前兩種適合沒(méi)有容易氧化的氨基酸,例如Trp、Cys、Met。第三種適合幾乎所有的序列。)
6、純化凍干:使用液相色譜純化,收集目標(biāo)峰液體,進(jìn)行凍干,獲得蓬松的粉末狀固體多肽。不過(guò)這時(shí)要取小樣復(fù)測(cè)下純度 是否目標(biāo)純度。
7、最后總結(jié):
杭州專肽生物技術(shù)有限公司(ALLPEPTIDE http://amynixphotography.com)主營(yíng)定制多肽合成業(yè)務(wù),提供各類長(zhǎng)肽,短肽,環(huán)肽,提供各類修飾肽,如:熒光標(biāo)記修飾(CY3、CY5、CY5.5、CY7、FAM、FITC、Rhodamine B、TAMRA等),功能基團(tuán)修飾肽(疊氮、炔基、DBCO、DOTA、NOTA等),同位素標(biāo)記肽(N15、C13),訂書肽(Stapled Peptide),脂肪酸修飾肽(Pal、Myr、Ste),磷酸化修飾肽(P-Ser、P-Thr、P-Tyr),環(huán)肽(酰胺鍵環(huán)肽、一對(duì)或者多對(duì)二硫鍵環(huán)),生物素標(biāo)記肽,PEG修飾肽,甲基化修飾肽
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