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專注多肽 服務(wù)科研
編號(hào): | 200115 |
中文名稱: | 三肽γGlu-γGlu-γGlu |
英文名: | Tri-γ-glutamic acid. |
單字母: | H2N-γGlu-γGlu-γGlu-OH |
三字母: | H2N N端氨基:N-terminal amino group。在肽或多肽鏈中含有游離a-氨基的氨基酸一端。在表示氨基酸序列時(shí),通常將N端放在肽鏈的左邊。 -γGluγ谷氨酸 -γGluγ谷氨酸 -γGluγ谷氨酸 -OHC端羧基:C-terminal carboxyl group。在肽或多肽鏈中含有游離羧基的氨基酸一端。在表示氨基酸序列時(shí),通常將C端放在肽鏈的右邊。 |
氨基酸個(gè)數(shù): | 3 |
分子式: | C15H23N3O10 |
平均分子量: | 405.36 |
精確分子量: | 405.14 |
等電點(diǎn)(PI): | - |
pH=7.0時(shí)的凈電荷數(shù): | 0.97 |
平均親水性: | 3 |
疏水性值: | -3.5 |
消光系數(shù): | - |
來(lái)源: | 人工化學(xué)合成,僅限科學(xué)研究使用,不得用于人體。 |
儲(chǔ)存條件: | 負(fù)80℃至負(fù)20℃ |
標(biāo)簽: | 氨基酸衍生物肽 三肽 |
Tri-γ-glutamic acid.
DOI | 名稱 | |
---|---|---|
10.1021/ac035422g | Radiolytic modification of acidic amino acid residues in peptides: probes for examining protein-protein interactions | 下載 |
10.4161/cbt.3.6.846 | Use of methotrexate-based peptide substrates to characterize the substrate specificity of prostate-specific membrane antigen (PSMA) | 下載 |
10.1016/j.bbagen.2004.10.005 | Peptides and hydrolysates from casein and soy protein modulate the release of vasoactive substances from human aortic endothelial cells | 下載 |
10.1021/bi035740+ | Tripeptides with ionizable side chains adopt a perturbed polyproline II structure in water | 下載 |
10.1021/ic4009575 | Formation constants of copper(II) complexes with tripeptides containing Glu, Gly, and His: potentiometric measurements and modeling by generalized multiplicative analysis of variance | 下載 |
多肽H2N-γGlu-γGlu-γGlu-COOH的合成步驟:
1、合成CTC樹脂:稱取1.9g CTC Resin(如初始取代度約為0.6mmol/g)和1.37mmol Fmoc-γGlu(OtBu)-OH于反應(yīng)器中,加入適量DCM溶解氨基酸(需要注意,此時(shí)CTC樹脂體積會(huì)增大好幾倍,避免DCM溶液過(guò)少),再加入3.42mmol DIPEA(Mw:129.1,d:0.740g/ml),反應(yīng)2-3小時(shí)后,可不抽濾溶液,直接加入1ml的HPLC級(jí)甲醇,封端半小時(shí)。依次用DMF洗滌2次,甲醇洗滌1次,DCM洗滌一次,甲醇洗滌一次,DCM洗滌一次,DMF洗滌2次(這里使用甲醇和DCM交替洗滌,是為了更好地去除其他溶質(zhì),有利于后續(xù)反應(yīng))。得到 Fmoc-γGlu(OtBu)-CTC Resin。結(jié)構(gòu)圖如下:
2、脫Fmoc:加3倍樹脂體積的20%Pip/DMF溶液,鼓氮?dú)?0分鐘,然后2倍樹脂體積的DMF 洗滌5次。得到 H2N-γGlu(OtBu)-CTC Resin 。(此步驟脫除Fmoc基團(tuán),茚三酮檢測(cè)為藍(lán)色,Pip為哌啶)。結(jié)構(gòu)圖如下:
3、縮合:取3.42mmol Fmoc-γGlu(OtBu)-OH 氨基酸,加入到上述樹脂里,加適當(dāng)DMF溶解氨基酸,再依次加入6.84mmol DIPEA,3.25mmol HBTU。反應(yīng)30分鐘后,取小樣洗滌,茚三酮檢測(cè)為無(wú)色。用2倍樹脂體積的DMF 洗滌3次樹脂。(洗滌樹脂,去掉殘留溶劑,為下一步反應(yīng)做準(zhǔn)備)。得到Fmoc-γGlu(OtBu)-γGlu(OtBu)-CTC Resin。氨基酸:DIPEA:HBTU:樹脂=3:6:2.85:1(摩爾比)。結(jié)構(gòu)圖如下:
4、依次循環(huán)步驟二、步驟三,依次得到
H2N-γGlu(OtBu)-γGlu(OtBu)-CTC Resin
Fmoc-γGlu(OtBu)-γGlu(OtBu)-γGlu(OtBu)-CTC Resin
以上中間結(jié)構(gòu),均可在專肽生物多肽計(jì)算器-多肽結(jié)構(gòu)計(jì)算器中,一鍵畫出。
最后再經(jīng)過(guò)步驟二得到 H2N-γGlu(OtBu)-γGlu(OtBu)-γGlu(OtBu)-CTC Resin,結(jié)構(gòu)如下:
5、切割:6倍樹脂體積的切割液(或每1g樹脂加8ml左右的切割液),搖床搖晃 2小時(shí),過(guò)濾掉樹脂,用冰無(wú)水乙醚沉淀濾液,并用冰無(wú)水乙醚洗滌沉淀物3次,最后將沉淀物放真空干燥釜中,常溫干燥24小試,得到粗品H2N-γGlu-γGlu-γGlu-COOH。結(jié)構(gòu)圖見(jiàn)產(chǎn)品結(jié)構(gòu)圖。
切割液選擇:1)TFA:H2O=95%:5%、TFA:H2O=97.5%:2.5%
2)TFA:H2O:TIS=95%:2.5%:2.5%
3)三氟乙酸:茴香硫醚:1,2-乙二硫醇:苯酚:水=87.5%:5%:2.5%:2.5%:2.5%
(前兩種適合沒(méi)有容易氧化的氨基酸,例如Trp、Cys、Met。第三種適合幾乎所有的序列。)
6、純化凍干:使用液相色譜純化,收集目標(biāo)峰液體,進(jìn)行凍干,獲得蓬松的粉末狀固體多肽。不過(guò)這時(shí)要取小樣復(fù)測(cè)下純度 是否目標(biāo)純度。
7、最后總結(jié):
杭州專肽生物技術(shù)有限公司(ALLPEPTIDE http://amynixphotography.com)主營(yíng)定制多肽合成業(yè)務(wù),提供各類長(zhǎng)肽,短肽,環(huán)肽,提供各類修飾肽,如:熒光標(biāo)記修飾(CY3、CY5、CY5.5、CY7、FAM、FITC、Rhodamine B、TAMRA等),功能基團(tuán)修飾肽(疊氮、炔基、DBCO、DOTA、NOTA等),同位素標(biāo)記肽(N15、C13),訂書肽(Stapled Peptide),脂肪酸修飾肽(Pal、Myr、Ste),磷酸化修飾肽(P-Ser、P-Thr、P-Tyr),環(huán)肽(酰胺鍵環(huán)肽、一對(duì)或者多對(duì)二硫鍵環(huán)),生物素標(biāo)記肽,PEG修飾肽,甲基化修飾肽
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