Conopressin G是從獵螺（conus emperialis）的毒液中分離出來的一種縮血管素樣肽。

Conopressin G is a vasotocin-like peptide isolated from the venom of the worm-hunting snail (conus imperialis).

二硫鍵廣泛存在與蛋白結(jié)構(gòu)中，對穩(wěn)定蛋白結(jié)構(gòu)具有非常重要的意義，二硫鍵一般是通過序列中的2個Cys的巰基，經(jīng)氧化形成。
 

形成二硫鍵的方法很多：空氣氧化法，DMSO氧化法，過氧化氫氧化法等。
 

二硫鍵的合成過程，  可以通過Ellman檢測以及HPLC檢測方法對其反應(yīng)進程進行監(jiān)測。  
   

如果多肽中只含有1對Cys，那二硫鍵的形成是簡單的。多肽經(jīng)固相或液相合成，然后在pH8-9的溶液中進行氧化。      
 

當需要形成2對或2對以上的二硫鍵時，合成過程則相對復(fù)雜。盡管二硫鍵的形成通常是在合成方案的最后階段完成，但有時引入預(yù)先形成的二硫化物是有利于連合或延長肽鏈的。通常采用的巰基保護基有trt, Acm, Mmt, tBu, Bzl, Mob, Tmob等多種基團。我們分別列出兩種以2-Cl樹脂和Rink樹脂為載體合成的多肽上多對二硫鍵形成路線：
 

二硫鍵反應(yīng)條件選擇    
 

 二硫鍵即為蛋白質(zhì)或多肽分子中兩個不同位點Cys的巰基（-SH）被氧化形成的S-S共價鍵。 一條肽鏈上不同位置的氨基酸之間形成的二硫鍵，可以將肽鏈折疊成特定的空間結(jié)構(gòu)。多肽分 子通常分子量較大，空間結(jié)構(gòu)復(fù)雜，結(jié)構(gòu)中形成二硫鍵時要求兩個半胱氨酸在空間距離上接近。 此外，多肽結(jié)構(gòu)中還原態(tài)的巰基化學(xué)性質(zhì)活潑，容易發(fā)生其他的副反應(yīng)，而且肽鏈上其他側(cè)鏈 也可能會發(fā)生一系列修飾，因此，肽鏈進行修飾所選取的氧化劑和氧化條件是反應(yīng)的關(guān)鍵因素， 反應(yīng)機理也比較復(fù)雜，既可能是自由基反應(yīng)，也可能是離子反應(yīng)。      

反應(yīng)條件有多種選擇，比如空氣氧化，DMSO氧化等溫和的氧化過程，也可以采用H2O2，I2， 汞鹽等激烈的反應(yīng)條件。
 

空氣氧化法： 空氣氧化法形成二硫鍵是多肽合成中最經(jīng)典的方法，通常是將巰基處于還原態(tài)的多肽溶于水中，在近中性或弱堿性條件下（PH值6.5-10），反應(yīng)24小時以上。為了降低分子之間二硫鍵形成的可能，該方法通常需要在低濃度條件下進行。
 

碘氧化法：將多肽溶于25%的甲醇水溶液或30%的醋酸水溶液中，逐滴滴加10-15mol/L的碘進行氧化，反應(yīng)15-40min。當肽鏈中含有對碘比較敏感的Tyr、Trp、Met和His的殘基時，氧化條件要控制的更精確，氧化完后，立即加入維生素C或硫代硫酸鈉除去過量的碘。 當序列中有兩對或多對二硫鍵需要成環(huán)時，通常有兩種情況：
 

自然隨機成環(huán):       序列中的Cys之間隨機成環(huán)，與一對二硫鍵成環(huán)條件相似；
 

定點成環(huán)：       定點成環(huán)即序列中的Cys按照設(shè)計要求形成二硫鍵，反應(yīng)過程相對復(fù)雜。在 固相合成多肽之前，需要提前設(shè)計幾對二硫鍵形成的順序和方法路線，選擇不同的側(cè)鏈 巰基保護基，利用其性質(zhì)差異，分步氧化形成兩對或多對二硫鍵。       通常采用的巰基保護 基有trt, Acm, Mmt, tBu, Bzl, Mob, Tmob等多種基團。

定義

血管生成素（ANG），一種14,124 Da的蛋白質(zhì)，與腫瘤進展中的血管生成有關(guān)。它由腫瘤細胞分泌，腫瘤細胞是新生血管形成的有效誘導(dǎo)劑1。同時血管生成素可引起血管收縮并促使血壓升高。它是腎素-血管緊張素系統(tǒng)的一部分，這是降低血壓的藥物的主要靶標。血管緊張素（ANG）是血管緊張素原（AGT）在腎素和一系列酶的作用下形成的一組寡肽激素。

血管緊張素是一種肽類激素，引起血管收縮及隨后血壓升高。血管緊張素是一種寡肽類激素，具有強大的致渴作用。它是由前體分子血管緊張素原生成的，血管緊張素原是肝臟中產(chǎn)生的血清球蛋白。血管緊張素在腎素-血管緊張素系統(tǒng)中起重要作用(1)。腎素作用于血管緊張素原，產(chǎn)生血管緊張素I。在腎小球旁細胞中，當腎交感神經(jīng)興奮、腎內(nèi)血壓降低或運送到致密斑的Na+和Cl-離子降低，致密斑感受到較少的Na+時，腎小球旁細胞釋放的腎素增加。腎素裂解血管緊張素原中亮氨酸（Leu）和纈氨酸（Val）之間的肽鍵，生成含有十個氨基酸的多肽（DES-ASP），即血管緊張素I，血管緊張素I似乎沒有任何的生物活性，僅僅是作為血管緊張素II的前體。

發(fā)現(xiàn)

1885年，F(xiàn)ett等人首先從由HT-29人結(jié)腸腺癌細胞1調(diào)節(jié)的培養(yǎng)基中分離血管生成素，然后從正常哺乳動物的血漿2和牛奶中分離出血管生成素。隨后已從人，牛，兔，豬和小鼠的血清和牛乳中分離出它。血管生成素具有核糖核酸分解活性，與胰腺RNAse A 具有33％的序列同源性。合成肽'H-Glu-Asn-Gly-Leu-Pro-Val-His-Leu-Asp-Gln-Ser-Ile-Phe-Arg-Arg-OH（108-122）對應(yīng)于ANG抑制血管生成素的酶和生物活性。幾種C末端合成肽，包括（Ang 108-123），可顯著降低血管生成素誘導(dǎo)的新血管形成。

結(jié)構(gòu)特點

Acharya等人在2.4 0 A時確定了人類抗原的晶體結(jié)構(gòu)?？傮w結(jié)構(gòu)具有腎形三級褶皺，讓人聯(lián)想到RNaseA。核糖核酸裂解活性中心（His-13，His-114和Lys-40）和假定的受體結(jié)合位點，這兩個關(guān)鍵參與生物學(xué)功能是不同于Rnase A 。  分子的中心核心由帶有一對反平行扭曲的P結(jié)構(gòu)組成，形成了主拓撲，頂點處有殘基Ser-72和Gly-99。在這些中央鏈的任一側(cè)的兩個附加鏈（殘基41-47； 111-116）完成了主要的片狀結(jié)構(gòu)。結(jié)構(gòu)中存在3個螺旋H1，殘基3-14，H2，殘基22-33和H3，殘基49-58。

作用機理

ANG四個方面已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，是必要的ANG誘導(dǎo)的血管生成的過程中，ANG發(fā)揮其核糖核酸活動- ANG有一個非常弱的10 5 - 10 6比核糖核酸酶答：這更低的核糖核酸活動，因為嘧啶結(jié)合谷氨酰胺（Gln）117殘基“阻礙”了ANG的位點。然而，ANG的核糖核酸分解活性對于血管生成至關(guān)重要。ANG提神基底膜降解- ANG結(jié)合到一個上肌動蛋白內(nèi)皮細胞表面 ANG-肌動蛋白復(fù)合物從細胞表面解離并加速組織型纖溶酶原激活物（tPA）催化的纖溶酶從纖溶酶原的生成。ANG-肌動蛋白復(fù)合物促進基底膜和細胞外基質(zhì)的降解。該復(fù)合物允許內(nèi)皮細胞滲透并遷移到血管周組織中?；啄そ到馐茄苌傻幕咎卣鳌NG激活信號轉(zhuǎn)導(dǎo)- ANG結(jié)合至170-kDa的   位于內(nèi)皮細胞表面上的受體和引發(fā)第二信使系統(tǒng)。ANG與細胞表面肌動蛋白的結(jié)合導(dǎo)致細胞相關(guān)蛋白酶系統(tǒng)的活化，從而促進細胞侵襲。ERK1 / 2，蛋白激酶B / Akt1 已經(jīng)提出通過ANG刺激來激活這些途徑。ANG核易位-血管生成素通過受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用和核定位序列輔助的核輸入在內(nèi)皮細胞中進行核易位。核定位信號（NLS）位于蛋白質(zhì)的31-RRRGL-35中。核易位后，它增強rRNA轉(zhuǎn)錄。

功能
血管緊張素受體存在于許多組織類型中，包括腎上腺皮質(zhì)，腎小球，心臟，下丘腦，肝臟，胰腺，垂體，血小板，腎小管，子宮和血管平滑肌。通過放射性配體與拮抗劑的結(jié)合已鑒定出兩種高親和力受體亞型：氯沙坦（DuP 753 / MK954）鑒定AT1受體；PD123177和CGP42112A是AT2受體的標記。血管緊張素II可能在體液系統(tǒng)外的組織中局部產(chǎn)生。例如，它存在于大腦，腎臟和心臟。在大腦中，七肽血管緊張素（1-7）模仿血管緊張素II的某些作用，但可能直接由血管緊張素I形成。心臟中有非ACE介導(dǎo)的血管緊張素II產(chǎn)生的證據(jù)。血管內(nèi)血管緊張素II受體與血管加壓素和其他垂體后葉激素的中樞釋放，交感神經(jīng)外流增加，口渴反應(yīng)以及可能的認知功能有關(guān)。血管緊張素II對心臟以及對生長/肥大的正性和變時性作用; 控制醛固酮的釋放以及皮質(zhì)醇和醛固酮分泌之間的平衡；并調(diào)節(jié)鈉，氯和碳酸氫鹽在腎臟內(nèi)的運輸。

ANG在血管生成中的功能-作為關(guān)鍵的血管生成因子，ANG與內(nèi)皮細胞和平滑肌細胞相互作用，誘導(dǎo)多種細胞應(yīng)答，包括細胞遷移，侵襲，增殖和腎小管結(jié)構(gòu)形成。還已經(jīng)報道ANG可直接誘導(dǎo)癌細胞的增殖。最近，ANG 基因被確定為潛在的肌萎縮性側(cè)索硬化癥（ALS）相關(guān)基因6。ANG可誘導(dǎo)多種人類癌癥中的腫瘤生長，包括乳腺癌，宮頸癌，結(jié)腸癌，結(jié)腸直腸癌，子宮內(nèi)膜癌，胃癌，肝癌，腎癌，卵巢癌，胰腺癌，前列腺癌和尿路上皮癌，以及星形細胞瘤，白血病，淋巴瘤，黑素瘤，骨肉瘤，和腎母細胞“腫瘤 6。ANG可能與肌萎縮性側(cè)索硬化癥有關(guān)-肌萎縮性側(cè)索硬化癥（ALS）是一種進展性遲發(fā)性神經(jīng)退行性疾病，會影響上下運動神經(jīng)元（MNs）。血管內(nèi)皮生長因子是第一個被證明與ALS 7發(fā)病有關(guān)的血管生成因子。