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專注多肽 服務(wù)科研
生物素化的肽在免疫檢測研究中非常有用,例如將肽連接到抗生物素蛋白包被的微量滴定板。
在Fmoc固相多肽合成過程中,生物素可以連接至肽段的N端或賴氨酸(Lys)的側(cè)鏈。
在生物素和肽之間摻入Linker可用于減少隨后的生物素與抗生物素蛋白結(jié)合的空間位阻。常用Linker分為 烴鏈和聚環(huán)氧乙烷PEG鏈兩種,后者具有改善試劑和生物素化肽的溶解度的附加優(yōu)點。
下面主要是通過結(jié)構(gòu)圖來展示下 不同linker,不同位置之間的結(jié)果區(qū)別。結(jié)構(gòu)圖由多肽結(jié)構(gòu)圖計算器自動生成。
以下所有結(jié)構(gòu)展示均以RGD三肽標記生物素為例。
1、生物素最常見的修飾位點,就是多肽的N端。
1.1 不使用Linker直接標記生物素,標記后的序列為 Biotin-RGD,結(jié)構(gòu)圖如下:
1.2 使用烴鏈作為Linker,最常見的就是 6-氨基己酸(簡寫為 Ahx 或Acp),標記后的序列為 Biotin-Ahx-RGD,結(jié)構(gòu)圖如下:
1.3 使用聚環(huán)氧乙烷PEG作為Linker,最常見的就是PEG2(也可簡寫為AEEA),標記后的序列為 Biotin-PEG2-RGD,結(jié)構(gòu)圖如下:
2、生物素標記在C端,通常在C端加一個賴氨酸,然后將生物素標記在賴氨酸的側(cè)鏈氨基上。
2.1 生物素直接標記在Lys的側(cè)鏈,標記后的序列為 RGD-Lys(Biotin),結(jié)構(gòu)圖如下:
2.2 生物素直接標記在Lys的側(cè)鏈并在生物素和Lys之間添加烴鏈,已增加空間距離,標記后的序列為 RGD-Lys(AhxBiotin),結(jié)構(gòu)圖如下:
以上所有序列,均可輸入到多肽參數(shù)計算器中,以計算多肽的各類參數(shù)。
最后總結(jié):
杭州專肽生物技術(shù)有限公司(ALLPEPTIDE http://amynixphotography.com)主營定制多肽合成業(yè)務(wù),提供各類長肽,短肽,環(huán)肽,提供各類修飾肽,如:熒光標記修飾(CY3、CY5、CY5.5、CY7、FAM、FITC、Rhodamine B、TAMRA等),功能基團修飾肽(疊氮、炔基、DBCO、DOTA、NOTA等),同位素標記肽(N15、C13),訂書肽(Stapled Peptide),脂肪酸修飾肽(Pal、Myr、Ste),磷酸化修飾肽(P-Ser、P-Thr、P-Tyr),環(huán)肽(酰胺鍵環(huán)肽、一對或者多對二硫鍵環(huán)),生物素標記肽,PEG修飾肽,甲基化修飾肽等。